合併低劑量順鉑與光動力治療對於口腔癌細胞株凋亡與上皮間質轉化之影響具加乘效應

Abstract

"口腔癌為全球第六大常見癌症，在台灣，儘管治療的方式一直在進步且推動早期篩檢，口腔癌仍蟬聯男性十大癌症發生率及死亡率之第四位已久。根據文獻，台灣口腔癌病人的總存活率(overall survival rate)只有50-60 %，影響的原因除了延遲治療外，病人也有一定的機率會發生局部復發(recurrence)、二次原發性癌症(second primary cancer)、及遠端轉移(metastasis)，都是當前口腔癌存活率沒有明顯改變的原因，而其中局部復發和二次原發性癌症都好發於初次原發癌(primary cancer)附近的位置，再次使用手術治療的可能性大幅降低，因此迫切需要找尋替代的治療方案。 許多文獻指出合併使用低劑量的光動力和化學治療在卵巢癌、膀胱癌、血癌、淋巴瘤中都具有協同效果，但是應用在口腔癌上的研究較少，且其中機制尚未釐清。而光動力治療與順鉑都是需要比較長時間的療法，產生抗光性及抗藥性機率不低，所以本篇主要研究低劑量光動力治療與順鉑在口腔癌上是否具有協同效果，並嘗試探討其中機制，另外將探討當細胞對光動力治療或順鉑均產生抗性時，合併療法是否也能順利作用，還有將討論合併治療是否能抑制上皮細胞間質轉化，降低口腔癌細胞轉移的機率。 實驗結果顯示，合併使用低劑量的光動力治療和順鉑會對口腔癌細胞造成大量毒殺效果，比單獨光動力治療或順鉑治療造成的死亡率都高，說明合併治療具有協同效果。而其效果可能源於加入低劑量的順鉑可以誘導肽轉運蛋白1 (Peptide transporter 1 , PEPT1)的表現量上升，進而提高5-ALA的攝取，促進細胞中原紫質IX (Protoporphyrin IX, PpIX)的累積，當給予適當波長的光線後，能夠產生大量的活性氧類(Reactive oxygen species,ROS)造成細胞大量死亡。當細胞產生順鉑抗藥性時，使用合併療法依然能得到良好的治療效果，顯示造成順鉑抗藥 性的原因並不會影響到協同效果的產生；然而當細胞產生光動力抗光性時，觀察到不論是單獨給予5-ALA或是先給予低劑量順鉑後再加入5-ALA，抗光性細胞中的PpIX都比親代細胞顯著減少許多，而無法觀察到明顯的協同效果，其原因可能為抗光性細胞中高表現量的鐵螯合酶 (Ferrochelatase, FECH)會將PpIX大量代謝成血基質(heme)，降低光動力治療的效果，但在加入FECH抑制劑後可以明顯改善治療效果。 同時透過傷口癒合測試和跨孔遷移測試可以觀察到經合併療法處理過後的細胞在水平及垂直遷移都有被顯著抑制的效果，甚至比單獨光動力治療或單獨順鉑治療的效果還要好。另外透過西方墨點法可以得知，經過合併治療後，上皮細胞間質轉化(Epithelial-mesenchymal transition, EMT)和侵襲(invasion)相關的蛋白表現量也都有顯著下降，說明合併治療有能力可以減少腫瘤轉移的機會。但是就此篇實驗觀察，應該不全然是由ROS抑制EMT和invasion相關蛋白表現，因為在合併治療的同時加入ROS抑制劑-乙醯半胱氨酸(N-acetyl cysteine, NAC)後，部分蛋白表現並沒有回歸到原本的狀態，推測低劑量的順鉑可能也會造成些許的影響。 由於合併低劑量的順鉑與光動力治療對口腔癌親代細胞、具順鉑抗藥性的細胞、具光動力抗光性的細胞都具有良好的治療效果，且具有降低細胞轉移的能力，又是一種非侵入性的治療，很適合作為局部復發和二次原發性癌症的替代治療方案。"