WRKY25與HDA6交互作用對於鹽分逆境反應及開花的影響

Abstract

WRKY轉錄因子在逆境下扮演重要的角色，也被報導與多種蛋白會有交互作用。WRKY為植物特有之轉錄因子，可透過與w-box結合活化或是抑制以調節下游基因表現，並對植物生理功能上做出相對應的反應。透過雙分子螢光互補實驗發現14-3-3w及HDA6對於WRKY25有交互作用，其功能還不明確。另外，為了瞭解HDA6上的磷酸化位點為何，我們也透過激酶活性分析發現其片段中三到四個位點對於磷酸化似乎有著其重要性。為了研究WRKY25與HDA6交互作用之功能為何，我們將hda6突變株 (hda6-6) 與WRKY25大量表現株進行雜交。在鹽處理下，WRKY25大量表現株與35S:WRKY25/hda6-6與野生型相比有較高的生存率，hda6-6則是對野生型有相對低的生存率，表示35S:WRKY25/hda6-6抗鹽的表現型貢獻自WRKY25。另外我們也針對開花時間進行測試。過去文獻中發現hda6-6有晚開花的現象，而在實驗中發現WRKY25大量表現株會有早開花的現象，而35S:WRKY25/hda6-6則是介於兩者之間，表示大量表現WRKY25似乎能部分互補hda6-6對於開花的功能，使其開花時間提前發生。另外，也針對WRKY25潛在的磷酸化位點進行突變，我們發現到似乎WRKY25 第345號蘇胺酸為14-3-3w與WRKY25結合位，並且第345號蘇胺酸點突變株在鹽逆境下的生存率是有所差異的。綜合上述結果，阿拉伯芥中WRKY25可能透過與HDA6及14-3-3w之交互作用，並對於鹽分逆境與開花上有所調控。