奈米/次微米靈芝懸浮液與其功能性成分對免疫調節之影響

Abstract

靈芝是一種使用歷史悠久，具有生理功能的藥用真菌類，傳統上以熱水萃取方式獲得靈芝茶或將子實體乾燥研磨成粉末後使用。本實驗以介質研磨方式製備奈米/次微米靈芝懸浮液，與熱水萃取物之成分以及功能性進行比較，並以細胞毒性試驗以及致突變性試驗，初步確認奈米/次微米靈芝懸浮液之安全性。靈芝子實體在 3小時的介質研磨處理過程中，菌絲的中空結構被撕裂為片狀後，不斷與研磨介質產生摩擦、碰撞，變成碎片，最後變為微小碎片。研磨的產品中，大部分的懸浮粒子之粒徑小於1 μm，且有 62 % 的粒子小於0.1 μm；以掃描式電子顯微鏡 (SEM) 觀察，也確認了樣品的粒徑為奈米/次微米等級。濾除渣質後，奈米/次微米靈芝懸浮液收率為21.5%，靈芝熱水萃取物則為15.4%，且介質研磨樣品中多醣、蛋白質與1,3-β-glucan (3.5倍) 等物質含量也較熱水萃取組高，顯示以介質研磨處理方式萃取效率較佳。以0.45 μm濾膜除菌的奈米/次微米靈芝懸浮液 (S-supernatant) 與靈芝熱水萃取物 (S-extract) 並不會增加沙門氏菌的突變率，也不具有抑制突變的效果。細胞毒性試驗則顯示，樣品對小鼠消化道、肝臟與腎臟的初代細胞不具有毒性，且會刺激細胞生長，提升細胞存活率。奈米/次微米靈芝懸浮液的多醣萃取物中所含的1,3-β-glucan較熱水萃取組多出約1.7倍，但分支少，分子量較低；蛋白質萃取物中有部分蛋白質分子與冷水萃取物蛋白質的分子量相似，但多醣含量較高，熱水萃取組蛋白質的結構則大多已被高溫破壞。免疫活性測定顯示奈米/次微米靈芝與熱水萃取物，以及兩者的粗多醣與粗蛋白萃取物，皆會刺激小鼠腹腔巨噬細胞分泌細胞激素，其中以s-supernatant的效果最強。介質研磨處理方法所製備的三組樣品傾向增加脾臟細胞的Th1細胞激素分泌，並抑制Th2細胞激素，動物實驗也呈現類似結果；熱水萃取方式處理之三組樣品，則傾向同時促進Th1與Th2細胞激素的分泌。本研究初步判定以介質研磨方式製備奈米/次微米靈芝懸浮液，所獲得的萃取物不具有細胞毒性與致突變性，且活性成分與功效不同於傳統熱水萃取物，活性成分結構與免疫調節效果之相關性，則有待更進一步的分析。