菸草毛狀根形成機制之探討

Abstract

根毛農桿菌會將T-DNA插入植物染色體並誘導植物生成毛狀根，T-DNA上的rolB與rolC基因在毛狀根誘導與側根生長中扮演重要角色。RolC之交互作用蛋白篩選無法在現成之酵母菌雙雜合系統中進行，因為RolC蛋白本身會自活化影響篩選，因而建立一系列的RolC突變，篩選具有較低自活化能力之突變。A119K+P120D突變有最低的自活化能力，N91K與G76K亦具有不錯之效果，將A119K+P120D突變RolC置換回根毛農桿菌中，其生長與野生型農桿菌相同，另外也以突變RolC農桿菌誘導菸草毛狀根，其根生長形態與野生型相近。接著以A119K+P120D突變RolC進行酵母菌雙雜合篩選，發現兩個可能與RolC有交互作有的蛋白質，分別為quinolinate合成酶與延伸因子1a (elongation factor 1-a)，在酵母菌單雜交實驗中發現延伸因子1可能與RolC有交互作用，後續將進一步驗證此交互作用之真偽。 在先前研究中本實驗室發現一群可能受rolB或rolC調控之脂質轉移蛋白(LTP)，找出這些LTP全長cDNA並檢驗這些LTP、rolB與rolC在不同荷爾蒙處理之毛狀根中的表現，我們發現LTP之表現與rolB或rolC之表現關聯性並不大，顯示LTP可能並不直接受到rolB或rolC之調控。而LTP6與LTP7表現量調降之毛狀根，與rolB或rolC缺失之毛狀根有類似的側根生長抑制之現象。