紅色吳郭魚骨骼肌專一性基因的選殖、定序及比較

Abstract

選用rat troponin T exon-15 當 probe 從紅色吳郭魚骨骼肌建立的 cDNA library中，在同一 phage particle中，選殖出二段 cDNA 並加以定序，該 cDNA 片段分別有 2944 及 927 個核甘酸，前者包含5’端末轉譯區的 300 個核甘酸，轉譯區的 1830 個核甘酸，共可譯成 610 個胺基酸和3’端末轉譯區的 615 個核甘酸，此段 cDNA 與 rat TnT 比較，則有 67 ％的相似性， T1 轉譯成的胺基酸分子量約 68K daltons ，其 isoelectric point (PI) = 9 . 72 並具有 3 個 N－ glycosylation site 及 3 個 cAMP－and cGMP - dependent protein Kinase phosphorylation site ．後者包含5’端末轉譯區的 52 個核甘酸，轉譯區的 678 個核甘酸，共可轉譯成 226 個胺基酸及 3 ’端末轉譯區的 196 個核甘酸．而 T2所轉譯成的核甘酸分子量約 26K Daltons ，其 PI 值為 8.24 ，並具有3 個 protein Kinase C phosphsrylation site 。 最後以所得的cDNA insert 作 Northern blot ，分析是否具有組織專一性．在所取得的骨骼肌，平滑肌，心肌，肝，表皮，鰓等 6 個組織中，僅骨骼肌具有正反應，顯示所篩選到的基因為骨骼肌專一性基因。