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| DC 欄位 | 值 | 語言 |
|---|---|---|
| dc.contributor.advisor | 周正俊(Cheng-chun Chou) | |
| dc.contributor.author | Yen-shan Yeh | en |
| dc.contributor.author | 葉宴珊 | zh_TW |
| dc.date.accessioned | 2021-06-16T17:41:41Z | - |
| dc.date.available | 2017-08-16 | |
| dc.date.copyright | 2012-08-16 | |
| dc.date.issued | 2012 | |
| dc.date.submitted | 2012-08-14 | |
| dc.identifier.uri | http://tdr.lib.ntu.edu.tw/jspui/handle/123456789/64341 | - |
| dc.description.abstract | Cronobacter spp. 先前歸屬於Enterobacter sakazakii。在本研究中先將C. sakazakii BCRC 13988置於含5%乙醇，60 min進行次致死壓力處理後，探討其於後續壓力環境如過氧化氫(20 ppm)、模擬胃液(pH 2.0、3.0、3.5、4.0)、膽鹽(0.5、2.0%)以及在乳酸發酵過程與市售發酵乳儲存時存活之情形，並進一步比較乙醇處理與控制組菌體蛋白質之表現。結果發現，除在膽鹽溶液外，次致死乙醇處理顯著(p<0.05)提高了C. sakazakii菌體暴露於所試之壓力下之存活。與控制組菌體相比，一維電泳分析(one dimensional electrophoresis)顯示乙醇處理菌體中，有7種蛋白質表現量上升，2種蛋白質表現量下降。二維電泳分析(two dimensional electrophoresis)則顯示，乙醇處理影響了菌體中16種蛋白質之表現。其中有7種蛋白質表現量上升，9種蛋白質表現量下降。將表現量上升之蛋白質進一步以液態層析串聯質譜儀(LC-MS/MS)結合資料庫(Mascot)搜尋鑑定出其中之5種蛋白質，這些蛋白質依照其功能性可區分為以下幾種:伴隨蛋白與蛋白質修飾、核醣體結構與生合成、脂質代謝。這些表現量上升之蛋白質可能與次致死乙醇處理提高菌體在不同環境壓力下之存活有關，同時也調控了菌體細胞內的生理反應。 | zh_TW |
| dc.description.provenance | Made available in DSpace on 2021-06-16T17:41:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ntu-101-R99641020-1.pdf: 3133141 bytes, checksum: 4537b1e891e87bd093add74aee9e2cfd (MD5) Previous issue date: 2012 | en |
| dc.description.tableofcontents | 目錄
頁次 中文摘要 ………………………………………………………………………………………………………………..ii Abstract ……………………………………………………………………………………………………………………iii 目錄 …………………………………………………………………………………….…………………………………iv 表目錄 ………………………………………………………………………………………………..…………………vii 圖目錄 …………………………………………………………….…………………………………………………...viii 壹、 前言 …………………………………………………………...………………………………………………….1 貳、 文獻整理 ……………………………………………………………………………………………………….2 一、 Cronobacter sakazakii …………………………………………………………………………….2 (一) 分類與生理生化特性 …………………….………………………………………………2 (二) 基本生理特性 ……………………………………………………………………..…..…….6 (三) 分布及來源……………………………………………….……………………………….……8 1. 嬰兒配方奶粉 ……………………………………………………….…………….……9 2. 臨床來源 …………………………………………………………….…….……….……12 3. 食品及環境 …………………………………………………..……………………..…13 (四) C. sakazakii的致病性 ……………………………………………………..………....13 (五) C. sakazakii於壓力環境下之抗性………………………….….….…………....16 二、乙醇與壓力反應 ………………………………...……………………………...….…………19 (一) 乙醇之性質 …………………………...……………………………………….………..…20 (二) 乙醇壓力反應………………………………….……….......................................21 參、 材料與方法 ………………………………………………………………………………………...…...... ..27 一、 實驗架構 ………………………………………………………………………………….……........27 二、 實驗材料 ……………………………………………………………………….……….……..........27 (一) 菌種 ………………………………………………………………………….…….…………….27 (二) 培養基 ………………………………………………………………………………..…………27 (三) 試驗藥品 ……………………………………………………………………….……..……….27 (四) 奶粉………………………………………………………………………………………………..28 (五) 市售發酵乳製品…………………………………………………………………………….28 (六) 儀器設備 …………………………………………………………………….……….…...29 三、 實驗方法 …………………………………………………………………………………………..30 (一) 菌株之保存 …………………………………………………………………..…....…...30 (二) 實驗菌株接種源之製備 …………………………………………….……..……...30 (三) C. sakazakii之次致死乙醇處理 ……………………………..……..………...30 (四) 乙醇處理影響C. sakazakii於過氧化氫之耐受性試驗………….31 (五) 乙醇處理影響C. sakazakii在模擬胃酸及膽鹽下之耐受性試驗.31 (六) 乙醇處理影響C. sakazakii於牛乳乳酸發酵及產品中之生長與 存活試驗………………………………………………………….31 (七) 乙醇處理影響C. sakazakii之蛋白質表現……………………… 32 (八) 乙醇處理誘導產生之蛋白質鑑定………………………………. .34 (九) 菌數測定............................................................................................36 (十) 統計分析............................................................................................37 肆、結果與討論………………………………………………………………..….……………….……….38 一、乙醇處理影響C. sakazakii在過氧化氫(20ppm)中之存活…………….38 二、乙醇處理影響C. sakazakii在模擬胃酸及膽鹽下之耐受性………….38 (一)、乙醇處理影響C. sakazakii暴露於模擬胃酸下之存活………..38 (二)、乙醇處理影響C. sakazakii暴露於在膽鹽環境下之耐受性…..43 三、乙醇處理對C. sakazakii於乳酸發酵過程與產品貯存時之活性之 影響…………………………………………………………………. 47 (一)、C. sakazakii單獨或混合乳酸菌發酵脫脂乳過程中滴定酸度及 pH之變化……………………………………………………………………………….. 47 (二)、乙醇處理影響 C. sakazakii在脫脂乳乳酸發酵過程中之存活...48 (三)、C. sakazakii 之添加對脫脂乳中乳酸菌生長性狀之影響………..48 (四)、乙醇處理影響 C. sakazakii 在市售發酵乳貯存期間之存活….53 四、乙醇處理對 C. sakazakii 蛋白質表現之影響……………………...55 (一)一維膠體電泳分析乙醇處理C. sakazakii蛋白質表現之影響...55 (二)二維膠體電泳分析乙醇處理C. sakazakii蛋白質表現之影響…...57 五、乙醇處理所誘導 C. sakazakii 之蛋白質身分鑑定…………………..61 (一) 液態串連式質譜儀之C. sakazakii蛋白質身分鑑定結果………61 1.60kDa chaperonin……………………………………………. 61 2. Elongation factor thermo unstable…………………………….64 3. Thioredoxin-1…………………………………………………66 4.Regulator of ribonuclease activity …………………………… 69 5. 3-oxoacyl-[acyl-carrier-protein] synthase III ……………… 70 伍、結論…………………………………………………………………….72 陸、參考文獻……………………………………………………………… 73 | |
| dc.language.iso | zh-TW | |
| dc.subject | 阪崎腸桿菌 | zh_TW |
| dc.subject | 蛋白質表現 | zh_TW |
| dc.subject | 乙醇處理 | zh_TW |
| dc.subject | 活率 | zh_TW |
| dc.subject | C. sakazakii | en |
| dc.subject | ethanol shock | en |
| dc.subject | viability | en |
| dc.subject | protein expression | en |
| dc.title | 次致死乙醇處理影響阪崎腸桿菌之蛋白質表現及其在後續致死壓力下之存活 | zh_TW |
| dc.title | Effect of sub-lethal ethanol treatment on the protein expression of Cronobacter sakazakii and its viability during exposure to subsequent lethal stresses | en |
| dc.type | Thesis | |
| dc.date.schoolyear | 100-2 | |
| dc.description.degree | 碩士 | |
| dc.contributor.oralexamcommittee | 丘志威,蔡國珍,潘崇良,游若萩 | |
| dc.subject.keyword | 阪崎腸桿菌,乙醇處理,活率,蛋白質表現, | zh_TW |
| dc.subject.keyword | C. sakazakii,ethanol shock,viability,protein expression, | en |
| dc.relation.page | 92 | |
| dc.rights.note | 有償授權 | |
| dc.date.accepted | 2012-08-15 | |
| dc.contributor.author-college | 生物資源暨農學院 | zh_TW |
| dc.contributor.author-dept | 食品科技研究所 | zh_TW |
| 顯示於系所單位： | 食品科技研究所 | |
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| 檔案 | 大小 | 格式 | |
|---|---|---|---|
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