CTEN 磷酸化的調控機制及功能

Abstract

"Tensin 家族都包含一個可以結合磷酸化酪胺酸 (pTyr) 的 Src 同源結構域 (SH2)，參與了許多訊息傳導的路徑。其中，tensin4 (CTEN) 在多種癌症中高度表達，且許多癌症相關生長因子都會誘導CTEN的表現量。當生長因子受體被細胞外配體活化，會引發一連串的訊息級聯反應而導致下游蛋白質的磷酸化。本實驗室先前的研究證實，當表皮生長因子受體 (EGFR) 信號被活化時，CTEN 的表現量不但上升，且 CTEN 蛋白質會被磷酸化。我們進一步發現 EGF 的刺激會經由 PI3K/AKT 和 MAPK/ERK 的訊息傳導路徑將 CTEN 上的 T347、S350 和 S386 三個位點磷酸化。然而，目前尚未得知磷酸化 CTEN 的激酶，以及磷酸化 CTEN 對癌細胞的影響。在本論文中，我們藉由 GST pull down 的實驗證明了 ERK 激酶會與 CTEN 結合，顯示 CTEN 有可能是 ERK 的受質。我們也發現除了 EGF，類胰島素生長因子 (IGF)、乙型轉化生長因子 (TGF-β) 和血小板衍生生長因子 (PDGF) 也能誘導 CTEN 的磷酸化。在穩定表達野生型 CTEN (CTEN-WT) 或三個磷酸化位點突變 CTEN (CTEN-M3) 的兩種細胞株中，CTEN 磷酸化與否對於一些上皮間質轉化標誌蛋白質如：N-Cadherin，與 CTEN 在細胞中的位置影響並不明顯，但會影響一些上皮間質轉化標誌如：Claudin-1, β-catenin, Snail 的蛋白質含量。另外，我們發現在 HeLa 細胞中，CTEN-WT 而非 CTEN-M3 能夠減緩 EGF 誘導的 EGFR 降解，推測 CTEN 磷酸化可能會促進 EGFR的穩定，進而有助於細胞的癌化。"