BCL11B 模擬蛋白於鼻 NK 細胞淋巴癌誘導 T-bet

Abstract

鼻 NK 細胞淋巴癌 (NNL) 是感染 Epstein-Barr 病毒 （EBV） 的侵襲性淋巴癌。 T-bet 是 NK 細胞產生 γ 型干擾素的關鍵轉錄因子。 EBV 編碼的 miR-BART20-5p 抑制了 T-bet 轉譯，同時抑制 p53 並造成 NNL 的侵襲行為。透過全基因 shRNA 文庫篩選，我們篩選出五個 shRNAs可以誘導 T-bet 表現。因此，受 shRNAs 標的的基因可能參與 miR-BART20-5p 抑制 T-bet 的路徑。其中，BCL11B 是一個可能的標的基因並且扮演抑制 T-bet的調節因子，透過與 T-bet 3'-UTR 的交互作用進而抑制 T-bet。我們預估BCL11B 的模擬蛋白可以阻斷 BCL11B 的調節功能並誘導 NNL 的 T-bet 作為治療。 以 BCL11B 鋅指結構域（ZFD）-EGFP 轉染的 YT 細胞可誘導 T-bet 和 p53 的表現。在我們的初步數據中，我們提出 ZFD 做為 NNL 的治療藥物的可能性。在相關文獻中，KIR2DL4 （CD158d） 在 NNL 中具有較高的表現量，而且人類白血球抗原 –G （HLA-G） 為 CD158d 的配體。結合 HLA-G 的 ZFD 可以更有效地誘導 YT 細胞凋亡。除此之外，透過細菌純化的 HLA-G-EGFP-ZFD 蛋白可在較高濃度下誘導 YT 細胞凋亡或壞死。 在進一步的實驗當中，我們將 HLA-G-EGFP-ZFD 的純化蛋白靜脈注射到動物模型中，發現此蛋白具有抑制腫瘤生長的效果。因此，我們預期這些結果的運用將可能開發作為 NNL 的替代治療。

Nasal NK-cell lymphoma (NNL) is an aggressive lymphoma infected with Epstein-Barr virus (EBV). T-bet is a key transcription factor for production of interferon-gamma on NK cells. EBV-encoded miR-BART20-5p inhibits T-bet translation with secondary suppression of p53 and causes an invasive behavior of NNL. By genome-wide shRNA library screening, we identified five shRNAs which could induce T-bet. ShRNAs-targeted genes may engage in the T-bet inhibition pathway triggered by miR-BART20-5p. BCL11B was a potential target gene and it was identified as a regulator to inhibit T-bet via interaction with 3’-UTR. We estimated that a mimic protein of BCL11B could block the regulator function of BCL11B and induce T-bet on NNL as a treatment. T-bet and p53 were induced on BCL11B zinc finger domains (ZFD)-EGFP transfected YT cells. In the preliminary data, we propose that ZFD might be a therapeutic for NNL. In the relevant literature, KIR2DL4 (CD158d) has higher expression on NNL and human leukocyte antigen -G (HLA-G) was known as CD158d ligand. HLA-G conjugated ZFD can induce YT cells apoptosis more effectively. In addition, HLA-G-EGFP-ZFD protein purified from bacteria can induce apoptosis or necrosis on YT cells under higher concentration. In the further experiments, we intravenously injected HLA-G-EGFP-ZFD into animal model and the tumor growth was inhibited. It is expected that we could use these results to develop an alternative therapeutic trial for NNL.