請用此 Handle URI 來引用此文件：
http://tdr.lib.ntu.edu.tw/jspui/handle/123456789/76092完整後設資料紀錄
| DC 欄位 | 值 | 語言 |
|---|---|---|
| dc.contributor.author | Shui一Chyr Duh | en |
| dc.contributor.author | 杜水池 | zh_TW |
| dc.date.accessioned | 2021-07-01T08:17:58Z | - |
| dc.date.available | 2021-07-01T08:17:58Z | - |
| dc.date.issued | 1994 | |
| dc.identifier.citation | (1) Cech, T.R. Biochemistry International 1989, Vol. 18, No.1,7 (2) Cech, T.R., Zaug, A.J., Grabowski, P.J. Cell 1981, 27,487 (3) Sumner, J.B., Somers, G.F. 1947 “Chemistry and Methods of Enzymes”, Academic Press : New York (4)工業用酵素市場調查（財團法人生物技術開發中心），中華民國七十八年出版 PP . 32－64 (5) Neurath, H. Adv. Protein Chem. 1957, 12, 320 (6) Howard, J.B. J. Biol. Chem. 1980, 255, 7082 (7) Davie, E.W., Fujikawa, K. Annu. Rev. Biochem. 1977, 46,799 (8) Neurath, H., Walsh, K.A. Proc Nail. Acad. Sci. USA.1976, 73, 3825 (9) Laskowski, M. Jr., Kato, I. Annu. Rev. Biochem. 1980, 49, 593. (10) Neurath, H. Science 1984, 224, 350 (11) Available from NOVO Industri A/S as a clear brown liquid. According to NOVO, one Anson Unit (AU) is the amount of enzyme which under standard conditions digests hameoglobin at an initial rate liberating per min an amount of TCA-soluble product which gives the same colour with phenol reagent as 1 mequiv. of tyrosine (1 AU=100 μMol of Tyr-OMe hydrolysed per min). Thus alcalase2.5L (trade nameof NOVO lndustri) contains 2.5 AUg-1 (12) A.Zaks & A.M. Klibanov Science 1984, 224, 1249 (13) G.A. Homandberg et al. Biochemistry 1978, 17, 5220 (14) P.N. Nehete et al. Enzyme. Microb. Technol .1986, vol.8, 370 (15) M.C. Srinivasan. et al. Biotechnology Letters 1983,Vol 5, 285 (16) Otto Folin and Vintila Ciocalteu. J. Biol. Chem. 1937, Vol. LXXIV, 627 (17) Anson, M.L., J. Gen. Physiol. 1938, 22, 77 (18) Laemmli, U.K., Nature 1970, 227, 1982 (19) 塗??碩士論文，台灣大學八十一學年度， p.118 (20) G.W. Hanlon et al. J. Gen. Microbiol. 1982, 128, 845 (21) John P. Viccaro et al. U.S. Patent 3, 748, 233 (22) Jyuichiro Fukumoto et al. U.S. Patent 3, 838, 009 (23) Ulrich Eberhad Giesecke et al . Appl. Micrbiol.Biotechnol. 1991, 35, 720 (24) T. Coolbear et al. J. Appl. Bacterio. 1991, 71, 252 (25) Szam et al. Intern. J. Clin. Pharmacol. Ther. Toxicol. 1972, 6,260 (26) J. Rossi and F. Clementi Biotechnology Letters 1985, Vo17, No.5, 329 (27) Bock, R.M. & Alberg, R.A. JACS 1953, 75, 1921 (28) B rant, D.A., Barnett, L.B. & Alberty, R.A. JACS 1963, 85, 2204 (29) Robert L.Hill and Ralph A. Bradshaw Methods Enzymol.1969, 13, 91 (30) Kanarek, L. et. al. J. Biol. Chem. 1964, 239, 4207 (31) John W. Teipel and Robert L. Hill J. Biol. Chem. 1971,246, 4859 (32) John W. Teipel and Robert L.Hill J. Biol. Chem. 1968,243, 5679 (33) Irwin A. Rose et al. Biochemistry 1993, 32, 8504 (34) Alvin I. Krasna, J. Biol. Chem. 1958, Vol. 233, 1010 (35)Kozo Yamamoto et al. European J. Appl. Microbiol.1 976, 3, 169 (36) Virginia R. Williams and Donald J. Lartigue J. Biol.Chem. 1967, 242, 2973 (37) Williams, V.R. & McIntyre, R.T. J.Biol. Chem. 1955,217, 467 (38) Jun S. Takagi et al. Biochem. Biophys. Res. Commun.1986, Vol. 138, 568 (39) Sally A. WOODS et al. Biochem. J. 1986, 237, 547 (40) Kanarek, L., and Hill, R.L., J. Biol. Chem. 1964, 239, 4202 (41) Tokushige, M., Miyamoto, K., & Katsuki, HJ. Biochem.1979, 85, 1415. (42) H.Y. Zhang et al. Biochem. Biophys. Res. Commun. 1993, Vol.192, 15 | |
| dc.identifier.uri | http://tdr.lib.ntu.edu.tw/jspui/handle/123456789/76092 | - |
| dc.description.abstract | 蛋白水解酵素在工業上的大量運用，使得其基本性質的研究益形重要；瞭解其勝?一級結構、水溶液及有機溶劑中的穩定性和反應機制等，可使我們更能有效的掌控這些酵素。
本論文使用的五種蛋白水解酵素（ alcalase ，三種從枯草桿茵 CCRC 11594 , CCRC 14353 及 CCRC 15413 發酵而得，另一種從絲狀?菌 Conidiobolus coronatus發酵而得），都能從微生物大量分泌取得。將這些酵素經過 TSK CM－650 ( S )陽離子交換層析及 DEAE 5PW 陰離子交換層析純化後，都能得到大於百分之九十的純度。經由實驗結果，五種酵素都屬於絲氨酸型的鹼蛋白水解酵素，活性pH值 9－10 時達到最高點。其在水溶液中的穩定性 ， PH 6.2 大於pH 8.0 ；而在不同含水量的乙醇溶液中，並未能看出含水量與穩定性的關係，但可看出在乙醇溶液中的穩定性比在水溶液中好（七天仍能保持大於百分之七十的活性）；因此，本論文中所使用的五種鹼蛋白水解酵素，不僅適用於各種工業用途（清潔劑的添加物、食品製造業. . . . . .等），也是研究酵素在有機溶劑中反應的良好題材。 本論文另一主題為研究合成 L－malic acid 的方法，由 fumarase 及 aspartase兩種酵素連續催化，可得到百分之八十四的 L－malic acid 及百分之十五點七的 L－aspartic acid ，而反應基質（ substrate ) fumarate則僅剩百分之零點三；利用丙酮萃取，可完全將 L－malic acid 及 L－aspartic acid 分離，得到純度甚高的 L－malic acid 。 | zh_TW |
| dc.description.provenance | Made available in DSpace on 2021-07-01T08:17:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 1994 | en |
| dc.description.tableofcontents | 摘要 . . . . . . . . . . . . . . 1 壹、緒論. . . . . . . . . . . . . . 2 貳、材料與儀器. . . . . . . . . . . . . . 9 參、菌種之培養與蛋白水解酵素之分泌 . . . . . . . . . . . . . . 13 一、實驗方法 1 ．菌種之保存與活化 . . . . . . . . . . . . . . 13 2 ．鹼蛋白水解酵素的分泌與活性測試. . . . . . . . . . . . . . 16 二、實驗結果與討論 1 ．菌種之保存與活化. . . . . . . . . . . . . . 19 2 ．鹼蛋白水解酵素的分泌與活性測試. . . . . . . . . . . . . . 20 肆、鹼蛋白水解酵素的純化 . . . . . . . . . . . . . . 22 一、實驗方法 1 ．鹼蛋白水解酵素的製備. . . . . . . . . . . . . . 23 2 ．鹼蛋白水解酵素的純化與活性測試. . . . . . . . . . . . . . 25 3 ．蛋白質的純度鑑定. . . . . . . . . . . . . . 27 二、實驗結果與討論 1 ．鹼蛋白水解酵素的製備. . . . . . . . . . . . . . 30 2 ．鹼蛋白水解酵素的純化與活性測試 . . . . . . . . . . . . . . 32 3 ．蛋白質的純度鑑定 . . . . . . . . . . . . . . 38 伍、鹼蛋白水解酵素的基本性質探討. . . . . . . . . . . . . . 40 一、實驗方法 1 ．鹼蛋白水解酵素的種類判別 . . . . . . . . . . . . . . 40 2 ．蛋白水解酵素活性的 PH 適應範圍（ pH optimum ）. . . . . . 42 3 ．鹼蛋白水解酵素穩定性之研究 . . . . . . . . . . . . . . 43 二、實驗結果與討論 1 ．鹼蛋白水解酵素的種類判別. . . . . . 45 2 ．鹼蛋白水解酵素活性的 pH 適應範圍（ PH optimum ）. . . . . 47 3 ．鹼蛋白水解酵素穩定性之研究 . . . . . . . . . . . . . . 48 陸、總結 . . . . . . . . . . . . . .54 柒、其他. . . . . . . . . . . . . . 56 捌、參考文獻 . . . . . . . . . . . . . .75 玖、附錄（一）. . . . . . . . . . . . . . 79 拾、附錄（二）. . . . . . . . . . . . . .80 | |
| dc.language.iso | zh-TW | |
| dc.title | 鹼蛋白水解酵素之純化及基本性質探討 | zh_TW |
| dc.title | Purification and General Properties of Alkaline Proteases | en |
| dc.date.schoolyear | 82-2 | |
| dc.description.degree | 碩士 | |
| dc.relation.page | 95 | |
| dc.rights.note | 未授權 | |
| dc.contributor.author-dept | 生命科學院 | zh_TW |
| dc.contributor.author-dept | 生化科學研究所 | zh_TW |
| 顯示於系所單位： | 生化科學研究所 | |
文件中的檔案：
沒有與此文件相關的檔案。
系統中的文件，除了特別指名其著作權條款之外，均受到著作權保護，並且保留所有的權利。