虎皮蛙細胞培養及其特性之研究

Abstract

本實驗之目的，乃是在培養虎皮蛙之細胞。並研究適合此種細胞生長之環境因數，諸如溫度、滲透壓、犢牛血清濃度等，並就已培養出之各器官細胞，做其外形之觀察與比較，以期建立虎皮蛙之永久細胞株。俾對此種蛙類之病毒診斷研究能有所幫助。 目前已建立虎皮蛙之心臟、腎臟、舌、肺臟、脾臟、肝臟細胞之初級培養，均可在短期（7?11天）內形成密集細胞層。而繼代培養之細胞如心臟細胞已培養至第20代，舌及肺臟細胞已培養至第7?8代，生長情形相當良好。其他腎、脾、肝臟細胞，在初級培養時，細胞生長及□離現象極活?，易形成密集細胞層，但繼代培養後，細胞生長情形不妙，原因不明。 依據所培養之6種不同器官之細胞，發現初級培養細胞多為上皮樣細胞，而繼代培養細胞以紡錘形細胞佔優勢。在掃描式電子顯微鏡下觀察，發現心臟、腎臟、脾臟細胞其表面微絨毛(microvilli)數目極少，有少數較大之泡沫狀突起(blebs)。 虎皮蛙心臟細胞最適宜生長溫度為24?31℃，滲透壓值為150?250mOsm/kg時生長良好。細胞隨培養液之血清濃度增高，生長速率亦隨之變快。在2％及5％犢牛血清之培養液內，則生長極?緩慢，細胞表面附著效應約為13-16％，顯示細胞未變性。