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http://tdr.lib.ntu.edu.tw/jspui/handle/123456789/59725
標題: | 利用人類脂肪幹細胞與奈米纖維製備細胞衍生模板應用於促進血管新生 Fabrication and Characterization of Human Adipose Stem Cell-derived Scaffold via Nanofibers for Enhancing Angiogenesis |
作者: | Shing Tak Li 李承德 |
指導教授: | 游佳欣(Jiashing Yu) |
關鍵字: | 細胞外間質,電紡絲,方向性,脂肪幹細胞,血管新生, extracellular matrix,electrospinning,orientation,hASC,angiogenesis, |
出版年 : | 2017 |
學位: | 碩士 |
摘要: | 細胞外間質對於組織工程的應用一直是生物醫學研究人員很感興趣的一環。細胞外間質生物支架能透過使用自體細胞來創造而成,使用自體細胞所生產的生物支架能有效減少使用異種和同種異體時所產生的免疫或排斥反應等等,更可改善自體組織供應不足的問題。
在這個研究當中,我們生產了具有方向性和不具有方向性的聚乳酸共聚物電紡絲纖維不織布作為細胞培養的基板。透過培養人類脂肪幹細胞在聚乳酸共聚物纖維不織布上,細胞—細胞外間質—不織布纖維混成物會在細胞培養後7 天所取得。最後,我們利用冷凍溶解週期的方式把材料上的細胞物質去除,再透過使用磷酸三鈉水溶液處理來移除聚乳酸共聚物不織布模板。剩下的細胞外間質會使用冷凍乾燥來處理並且經過滅菌過後成為我們的天然細胞外間質生物支架。 最後,人體脂肪幹細胞會被重新培養在我們所生成的天然細胞外間質生物支架上,透過使用雞胚尿囊膜生物實驗來驗證我們所生產出的天然細胞外間質生物支架是否具有促進血管新生和傷口修復的能力。而透過具有方向性和不具有方向性的奈米纖維實驗組別我們能直接比較纖維方向性對於細胞外間質生物支架的生成與效果有什麼影響,而結果顯示出具有方向性纖維材料能更有效幫助天然細胞外間質生物支架的形成。 Biomedical researchers found great interest in extracellular matrix (ECM) scaffolds derived from cultured cells for tissue engineering applications. ECM scaffolds can be prepared from autologous cells to generate autologous ECM (aECM) scaffolds. It can avoid the undesired host responses that may be induced by allogenic or xenogenic materials and circumvents the limited supply of autologous tissues. In this study, we first fabricate random and align PLGA meshes as a template for cell culturing using PLGA electrospun fibers. Afterward, Human adipose stem cell (hASCs) were seeded onto the PLGA template. Cell-ECM-PLGA constructs were formed by the cultured cells in the PLGA mesh after seven days. Finally, the whole product was decellularized by freeze-thaw cycling and tri-sodium phosphate aqueous solution treatment to remove the undesired PLGA template. The ECM left behind will be freeze-dried and sterilized. Finally, hASCS were seeded onto the ECM scaffold and tested in vivo by using Chick Chorioallantoic Membrane (CAM) assay. The results showed that the ECM scaffold provided wonderful effort in angiogenesis. And the ECM scaffold fabricated in the align PLGA mesh showed a better result compare to the random PLGA meshes. |
URI: | http://tdr.lib.ntu.edu.tw/jspui/handle/123456789/59725 |
DOI: | 10.6342/NTU201700548 |
全文授權: | 有償授權 |
顯示於系所單位: | 化學工程學系 |
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