探討c-Maf調節巨噬細胞中基因的表現

Abstract

巨噬細胞是先天性免疫反應的主要元素之一，他們組成了人體抵抗各式各樣病原體的第一道防線。在先前的研究中，c-Maf曾被報導會直接促進IL-10的表現，及藉由干擾c-Rel進入細胞核來抑制IL-12p35的表現。此外，c-Maf會直接促進F4/80的表現，使巨噬細胞呈現一種已分化完成的表型。當遇到環境中的污染物質-多環芳香烴，巨噬細胞中的c-Maf會與AhR結合共同促進intergrin β7的表現。由於c-Maf在巨噬細胞發育和面對細胞激素、環境汙染物及病原體的反應上扮演重要的角色，我的研究目的便是要深入地了解巨噬細胞中的c-Maf在免疫反應中所扮演的角色。 我們在生物體外極化骨髓幹細胞分化來的巨噬細胞為典型活化巨噬細胞(又稱為M1)和非典型活化巨噬細胞(又稱為M2)。我們發現c-Maf信使核醣核酸的表現量在M0最高，而c-Maf蛋白質的表現量在M1最高。 藉由信使核醣核酸微陣列的分析，我們得到了c-Maf野生型和剔除型的典型活化巨噬細胞和非典型活化巨噬細胞的基因表達譜。由比較c-Maf野生型和剔除型的巨噬細胞，我們可以導出哪些基因是受c-Maf的直接或間接調控。 到目前為止，我們已經檢驗了27個在c-Maf野生型和剔除型巨噬細胞中表現量差異超過兩倍的基因，其中的十個基因確實有顯著差異。其中一個基因為Ccr2，它在c-Maf剔除型的非典型活化巨噬細胞的表現量顯著高於c-Maf野生型的非典型活化巨噬細胞；其他的基因則為IL-6、IL-10、Cx3cr1、IL-12p35、IL-12p40、Clec5a、Tlr12、Runx3和Stat1，它們的表現量在c-Maf剔除型的典型活化巨噬細胞及c-Maf野生型的典型活化巨噬細胞間有顯著的差異。在這些基因中，我們藉由染色質免疫沉澱證實了在IL-12p40和Runx3啟動子上預測的保守c-Maf結合位。這顯示了c-Maf可藉由與IL-12p40和Runx3啟動子上的c-Maf結合位結合來直接地負調控IL-12p40和Runx3的表現。

Macrophages are major elements in innate immunity, and they comprise the first line of defense against various pathogens. In previous studies, c-Maf has been reported to transactivate IL-10 directly and inhibit IL-12p35 expression by interfering c-Rel nuclear translocalization. Moreover, c-Maf transactivates F4/80 and contributes to the terminally differentiated phenotypes of macrophages. In response to polycyclic aromatic hydrocarbon (PAH), an environmental contaminant, c-Maf cooperates with AhR to activate intergrin