C型肝炎病毒非結構性蛋白質NS3調節integrin訊息傳遞路徑

Abstract

C型肝炎病毒為單股正向RNA病毒，其正股基因體可轉譯成一多蛋白質前驅物，經由細胞內部及病毒本身的蛋白酶切割成結構性和非結構性蛋白質。非結構性蛋白質NS3由631個胺基酸組成，具有多功能性；其N端部分為serine protease，C端部分為RNA helicase。先前實驗室已證實，NS3蛋白質在NS4A蛋白質的輔助之下，可進行病毒多蛋白質切割和內部截切的功能。內部截切產生主要的截切產物NS3(1-402)，相較於其野生型具有更高度的細胞轉型能力。先前研究亦指出，NS3能使細胞在沒有貼附及低血清的情況下穩定生長。一般的細胞藉由貼附細胞外基質活化焦點黏著 (focal adhesion) 訊息傳遞路徑，調節細胞的增生、遷移、生長和細胞凋亡等功能。為了探究NS3蛋白質造成細胞轉型的機制，是否透過對focal adhesion訊息傳遞的影響，本研究首先利用共同免疫沉澱和GST pull down進行分析，結果偵測到focal adhesion細胞因子integrin β1能和NS3形成複合物。當NS3和integrin β1同時存在時，integrin β1蛋白質的表現量較單獨表現時會些微下降，且細胞週期相關蛋白質CDK inhibitor p21和p27會因NS3的同時表現有些微改變，推測 NS3的存在會干擾integrin β1活化的訊息傳遞。根據細胞附著實驗的結果顯示，細胞的貼附能力會受到NS3和integrin調節。MTT assay的結果也發現， integrin β1存在會抑制細胞生長，而integrin β1與NS3(1-402) 同時存在時的影響更為明顯。因此推測，NS3可能藉由影響integrin β1活化的訊息傳遞，進而影響細胞生長、貼附的能力，這個結果提供細胞轉型的可能機制。