以ENU基因突變鼠動物模式探討介白質-15異構體對單純性疱疹一型病毒引起CD8+ T細胞的免疫反應之影響

Abstract

介白質-15（interleukin-15，IL-15）是細胞激素的一種。除了參與免疫反應之外，同時也對體內其他生理機能扮演重要的角色，像是骨骼肌的代謝及角質細胞的增生。由於IL-15的作用廣泛，因此其表達在轉錄、轉譯及胞內運送的階段都被嚴密地調控。同時IL-15被發現有多種選擇性剪接異構體存在，除了對IL-15的分泌影響外，目前對於IL-15選擇性剪接異構體對於IL-15本身的調控及影響仍不清楚。在我們的研究中，利用國家型基因突變鼠核心實驗室以ENU誘導突變所建立的突變鼠品系191(p191)，經過人類疱疹一型病毒（Human Herpes Simplex Virus-1，HSV-1）的感染模式，希望能進一步了解IL-15選擇性剪接異構體對於CD8+ T細胞的免疫反應的影響。 我們透過表皮感染B6及p191小鼠HSV-1後發現，雖然B6小鼠在病毒感染後第4到5天形成傷口，並在第十天左右癒合；然而p191小鼠的疱疹傷口不但在病毒感染後第2到3天就開始出現，而且傷口可以持續到第12天左右才癒合。利用病毒溶斑的檢測方法我們也發現p191小鼠皮膚可以偵測到比B6小鼠中有更高的病毒數量(在感染後第七天有1000倍的差異)。結果顯示HSV-1在p191的皮膚不但可以複製地多，同時造成較大的皮膚傷口與修復的延遲。雖然在未感染的情況下，p191小鼠中NK1.1+細胞的數目就低於B6小鼠(50%左右)，但是經過HSV-1感染後，p191小鼠的NK1.1+細胞增加的倍數和B6小鼠相近(10倍左右)。p191小鼠中較少量的NK1.1+細胞可能直接或間接影響到皮膚中病毒的清除。不論是B6或是p191小鼠感染HSV-1後，引流淋巴結內的CD8+ T細胞總數均明顯增加(最高3.5倍的增加)。利用MHC Class I的tetramer進一步地分析比較兩組小鼠經過HSV-1感染後具有gB抗原特異性的CD8+ T細胞群的生成情形，我們發現這些具有抗原特異性的CD8+ T細胞在感染初期數目上差異不大，但是兩組小鼠的引流淋巴結與脾臟分佈則有明顯不同(B6小鼠中主要聚集在引流淋巴結，p191小鼠則是脾臟)。P191小鼠的抗原特異性CD8+ T細胞也可能因為Bcl-2蛋白表達下降而影響該組細胞的長期存活性。同時，我們也發現了皮膚衍生的樹突細胞感染HSV-1後移動到引流淋巴結的時間在B6(高峰於感染後第三天)與p191(高峰於感染後第五天)也不相同。究竟樹突細胞的抗原呈現功能與刺激活化CD8+ T細胞的能力是否在p191小鼠中有被改變，以及這些機制是否能夠直接地或是間接地影響皮膚傷口的嚴重程度、病毒繁殖複製與病毒清除的能力等方面，仍有待進一步地探討。