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http://tdr.lib.ntu.edu.tw/jspui/handle/123456789/32483
標題: | 以 Caco-2 細胞模式探討
ferric reductase 的活性與小腸攝鐵之必要性 The essential role of ferric reductase on intestinal iron absorption by a Caco-2 cell model |
作者: | Chia-Ling Hsieh 謝佳玲 |
指導教授: | 蕭寧馨 |
關鍵字: | Caco-2 細胞,ferric reductase,鐵蛋白, Caco-2 cell,ferric reductase,ferritin, |
出版年 : | 2006 |
學位: | 碩士 |
摘要: | Duodenal cytochrome b是小腸細胞膜上之三價鐵還原酵素(ferric reductase),其還原所需之電子可由維生素C提供。缺乏Dcytb的小鼠其體內鐵營養狀態與正常小鼠無顯著差別,反映Dcytb對於小鼠吸收三價鐵並無必需性。不同於小鼠,人類無法自行合成維生素C,因此Dcytb對於人類吸收三價鐵上的必需性需進一步探討。所以本研究利用人類大腸癌Caco-2細胞,探討Dcytb與鐵蛋白含量間之相關性,包括三個實驗:第一部份為比較2% FBS+DMEM及MEM中營養成分及攝鐵時間長短,兩項培養條件對ferric reductase活性及鐵蛋白量的影響;第二部分為比較還原力由高至低為桑椹、葡萄、奇異果、柳橙、蘋果之果汁對ferric reductase活性及鐵蛋白量的影響;第三部份為建立以siRNA抑制Caco-2細胞Dcytb基因表現之模式,及探討Dcytb 對Caco-2細胞於鐵吸收的機制上之必需性。此外,也探討還原力是否可作為評估鐵生物利用率之依據。第一部分結果顯示,以MEM為培養基進行攝鐵實驗,發現6及24小時後添加ascorbic acid (AA)組的酵素活性顯著增加,但6小時之鐵蛋白量與未添加組無差異,但24小時後其含量顯著上升。以2% FBS + DMEM為培養基,無論6及24小時,添加AA皆顯著增加酵素活性及鐵蛋白量;第二部分結果顯示,細胞ferric reductase活性由高至低為奇異果>桑椹>葡萄>柳橙、蘋果汁,鐵蛋白量由高至低為奇異果>桑椹>柳橙>葡萄>蘋果汁,且發現桑椹及柳橙汁並不能促進酵素活性,但鐵蛋白量皆顯著較只添加鐵源組高。第三部分結果顯示,保留30%之細胞Dcytb mRNA量,可能足以表現細胞70%之ferric reductase活性,而添加維生素C後,可能改善其ferric reductase活性降低之現象,使細胞可表現90%之ferric reductase活性。綜合上述,本研究發現duodenal cytochrome b可能對於人類小腸細胞攝鐵不具有必需性,但其缺乏表現時,仍可能影響鐵之生物利用率,不過可利用補充維生素C替代其降低之ferric reductase活性。此外,也發現並不能完全只用果汁的還原力作為評估鐵生物利用率之依據,可能還需依其組成主要成份來進行判斷。 |
URI: | http://tdr.lib.ntu.edu.tw/jspui/handle/123456789/32483 |
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顯示於系所單位: | 微生物學科所 |
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