台灣水產動物分離鏈球菌株對四環黴素與紅黴素抗藥性基因之調查與分析

Abstract

水產動物分離鏈球菌科細菌對台灣的養殖漁業造成嚴重的經濟損失，並引起敗血症、高死亡率的爆發，亦可呈現慢性不顯性的感染。但隨著使用藥物治療，抗藥性問題也漸漸產生。本研究收集來自於不同地區的魚類鏈球菌爆發病例共61株，對魚種分離年分來源做紀錄，使用根據生化性狀鑑定的API 20 Strep和16s rDNA定序將種別做鑑定，並將菌株進行紙錠擴散法和最小濃度測量以及抗藥性基因的聚合酶鏈鎖反應，以了解其收集菌株的抗微生物敏感性試驗和其機制。收集的菌株結果種別佔最大宗的為Lactococcus. garvieae，共有30株(49%)、Streptococcs iniae有20株(32%)、Streptococcus agalactiae有6株(9.8%)，3株Lactococcus lactis (4.9%)、Streptococcus dysgalactiae 1株(1.6%)和Enterococcus faecalis 1株(1.6%)。在Tetracycline部分，發現有26株呈現抵抗性皆攜帶有tet(S)，MIC值高達256 μg/mL以上，26株中有24株為L. garvieae，1株為L. lactis subsp. lactis，1株為Lactococcus lactis subsp. cremoris。其中編號970715(L. lactis subsp. lactis)同時擁有Tetracycline>256μg/mL，Erythomycin >256 μg/mL的MIC值。將之質體抽出進行分析、南方雜合將抗藥性基因定位，並用接合作用探討抗藥性基因的傳遞性。編號910723-2的Lactococcus lactis subsp. cremoris有一大小為3 kbp的質體，其tet(S)位於染色體上。編號970715的 L. lactis subsp. lactis有4個大小分別為23、15、12、9大小的質體，經由切膠偵測抗藥性基因tet(S)和erm(B)皆在質體上，選用Enterococcus faecalis當接受者，可在接合作用下共同傳遞抗藥性基因。24株L. garvieae皆有一大小為21 kbp的質體，選取5株亦可在接合作用下傳遞抗藥性基因tet(S)給E. faecalis。但選取無抗藥性質體的L. garvieae當接受者做接合作用，僅3株在接合作用下傳遞抗藥性基因tet(S)。