利用密碼子最適化的α-factor提升P. pastoris異源蛋白質外泌表現量

Abstract

異源基因表達為現今生技產業中一項重要的平台技術，但異源基因表達量會受許多因素影響，例如:宿主與異源基因密碼子偏性差異大小、宿主是否具有轉譯後修飾作用、啟動子的強度、轉形株的拷貝數、誘導培養條件是否最適化等。 嗜甲醇酵母菌異源表達系統如Pichia pastoris，具有簡易的分生操作、成熟的醱酵技術、良好蛋白質表現量及具轉譯後修飾作用等特點，為目前應用最廣泛的真核表達系統之一。本研究針對P. pastoris表達載體上的訊息胜肽alpha-factor，為來自Saccharomyces cerevisiae交配因子，探討其核酸序列密碼子最適化是否有助於提升外泌蛋白質表現量。以木聚醣酶xyn11B’做為目標基因，研究結果顯示，具有優化訊息胜肽alpha-factor的轉形株，其活性顯著提升，顯示此策略可以提升異源蛋白質表現量。