台灣草莓二點葉蟎蟲生真菌及其防治應用之研究

Abstract

台灣草莓二點葉蟎危害猖獗，目前只有化學合成藥劑以供防治，尚無推薦之生物農藥。本研究之目的，為嘗試分離草莓二點葉蟎身體上之蟲生真菌，研究其生物特性及應用作為非農藥防治草莓二點葉蟎資材，以期待能提供一種新的方式來防治二點葉蟎。 自田間採集受到二點葉蟎危害的草莓葉片，在 240 隻蟎體的分離中，共分得白色、淡綠色、灰白色和深綠色等4類菌株，經過初步鑑定，發現白色者為蠟蚧輪枝菌，最似為蟲生真菌。 對各分離株測定其外泌酵素，發現共9分群中之1 至 8 皆可偵測到幾丁質分解酵素之存在，菌落周圍皆出現透明之環狀帶，為膠態幾丁質被分解而呈透明所致。9分群中只有蠟蚧輪枝菌者可偵測到分解蛋白質酵素之存在，菌落周圍出現不透明之環狀帶。9分群中1 至 7 皆可偵測到分解脂質酵素之存在，其菌落周圍出現不透明之環狀帶。 以葉盤法對二點葉蟎進行蟲生真菌之接種，結果顯示純水對照組6天之死亡率為 4 % ，窄域油對照組處理 6 天之殺蟎率為 29 % ，蠟蚧輪枝菌接種者， 6 天殺蟎率平均為 71 % 。而以分群 7木黴菌菌株接種者， 6 天殺蟎率只為 18 %。以分群 8 之淡綠色菌落接種者， 6 天殺蟎率為 9 % 。分群 9 之灰白色菌落接種後， 6 天之殺蟎率為 19 % 。故只有蠟蚧輪枝菌者有比窄域油為佳之殺蟎率 檢查蟲生真菌接種後瀕臨死亡之二點葉蟎身體各部位，發現9分群之代表菌株接種二點葉蟎體表，均可觀察到菌絲存在。但只有分群1至6之蠟蚧輪枝菌可在體內觀察到孢子存在。分群 1 至 6菌株接種二點葉蟎體內可觀察到菌絲及孢子。其餘分群之 7 至 9 則在蟎體內皆未見有菌絲與孢子的存在。接種後進行病原再分離，分群1 至 6之蠟蚧輪枝菌之再分離率為 96 %。分群 7之木黴菌接種後再分離率為 33 %，分群 8 之淡綠色菌落接種後再分離率為 100 % ，分群 9 灰白色菌落接種後再分離率為 56 %。由以上證明分群 1 至 6之蠟蚧輪枝菌具有病原性。 在蟲生真菌之生理特性上，發現分群1之蠟蚧輪枝菌在PDA上，以 25 °C 生長最快，而在 35 °C 生長最慢。於SMAY液態培養基中，產孢量約自2至8日呈對數增加，而至第8天可達 2 X 106 / mL 在蟲生真菌的鑑定上，分群1之菌株(TP13)，經鑑定為蠟蚧輪枝菌 ( Lecanicillium lecanii )，寄主為二點葉蟎，受感染之二點葉蟎常見白色菌絲包覆，其菌絲在體內分布以蟎腹部為多( 90% )，受感染的蟎會停止移動、反應遲緩、足會有不正常之抽動，微觀可見菌體遍及整個血體腔。將此病原真菌分離以PDA培養七天，巨觀菌落呈白色，半圓形略隆起，菌落表面質地緻密，其氣生菌絲白色、絨毛狀，此菌在PDA之背面呈褐黃色，氣味為米糠味。 以紫外線照射蠟蚧輪枝菌誘變育種發現，照射 1 及 2 分鐘者，孢子發芽率均大於 99 % ，照射 3 及 4 分鐘後，孢子發芽率分別為 42 和 16 % ，而照射 5、 7 、 9 及 11 分鐘者，其孢子發芽率均小於 1 %。再以葉盤法進行誘變後蟲生真菌之接種，發現誘變菌株6天之殺蟎率，皆比原菌株TP13者為低，原TP13之6天殺蟎率有71%，而誘變菌株為34 - 46 %。其中11m-2和11m-3之殺蟎率只為34 - 39%，顯著低於其他之菌株。 以蠟蚧輪枝菌對半開放式溫室草莓二點葉蟎進行田間防治試驗，發現6 天後田間二點葉蟎數量降至63 % ，防治率為 53 %。而施用窄域油之對照組，防治率為 49 %。施用純水之防治率為 22 %。