藉EAST發展表現選殖具B型肝炎病毒專一性的CD8+T細胞接受器

Abstract

"雖然抗病毒藥物（包含nucleos(t)ide analogues (NAs) 和 interferon-α）已大量減少B型肝炎病毒（Hepatitis B virus, HBV）的負面風險，但慢性B型肝炎（chronic hepatitis B，CHB）患者即使在有效的抗病毒治療之後，HBV的共價閉合環狀DNA（closed circular DNA，cccDNA）仍能存在在受HBV感染的肝臟細胞中。欲使慢性B型肝炎痊癒需完全破壞cccDNA或清除所有受感染的肝臟細胞，而胞殺性T cell可藉由其表面的T細胞接受器（T cell receptor，TCR）和受感染肝臟細胞所表現的三聚體肽／主要組織相容性複合物（trimeric peptides/major histocompatibility complex, pMHCs）相互作用，特異性地以HBV感染的肝臟細胞為標的，且也可分泌interferon-γ (IFN-γ) 抑制病毒複製。因此，目前備受期待的治療方案為帶有HBV特異性TCR的工程性T細胞（engineered T cells with TCRs, TCR-T），它不僅具有完整的抗病毒能力，也可以用來特異性的辨認並殺死受HBV感染的肝臟細胞。然而，此方法需有效的辨認並選殖出經VDJ重組後具有功能性的TCR，目前針對尋找高親和力HBV-specific TCR-α/β pairs的方法 需要進行單細胞定序或選殖，不僅耗時、耗費人力，且通常需要特定儀器方可操作，故使功能性TCR的探尋更加複雜。為了解決這個困難，我們設計了一個新穎的選殖表現策略，可藉由reporter-Jurkat cells篩選HBV特異性T細胞，也利用Enrichment of Antigen-Specific T cells (EAST) ，例如：多聚體的分選方法（multimer-based sorting method），事先降低TCR library的複雜度，避開繁瑣的單細胞定序或選殖的方法，有機會能在很短時間內更有效率地找到具功能性的HBV特異性TCR，此法將可促進工程性T細胞用於慢性B型肝炎治癒治療的發展。"