探討中國橄欖萃取物對TNBS誘導腸炎小鼠的改善功效

Abstract

"發炎性腸道疾病是指消化道的慢性發炎疾病。主要分為潰瘍性結腸炎（UC）和克隆氏症（CD）。發炎性腸道疾病的發病率在亞洲持續增加，但發病的根本原因仍不清楚。目前最常使用的治療藥物有抗生素，例如：5-ASA，更嚴重的患者會使用生物製劑，例如：TNFα 的抑製劑英利昔單抗（Infliximab）。然而，長期使用這些藥物可能造成嚴重的副作用，因此仍迫切需要探究可以有效緩解發炎性腸道疾病且降低副作用的新療法。在本篇研究中，我們評估中國橄欖（Canarium album L.）是否具有可以緩解發炎性腸道疾病的潛力。由於在過去的研究中，我們已經發現中國橄欖的乙酸乙酯層萃取物（在本文中稱為COE）具有抗發炎的特性，在本研究中，我們首先使用 RAW264.7 小鼠巨噬細胞的平台來再次確認 COE 的抗發炎能力。我們觀察了幾種促炎介質的表現量，包含一氧化氮 (NO)、誘導型一氧化氮合成酶 (iNOS)、環氧合酶-2 (COX-2)、TNFα、IL-1β和 IL-6。冷光素酶檢測法的結果表明，與脂多醣（LPS）誘導組相比，以400 mg/L濃度的COE處理可顯著抑制iNOS啟動子的活性。此外，亞硝酸鹽檢測試驗的結果表明，濃度為 100、200、400 和 800 mg/L的COE 均能顯著抑制 LPS 誘導產生的 NO含量。 COE對LPS誘導的iNOS和COX-2蛋白質的表現量也有抑制作用。除此之外，我們也發現COE可以抑制RAW264.7細胞中促炎細胞因子的mRNA表現量，包含IL-1β和 IL-6。這些細胞實驗的發現促使我們更進一步研究 COE 對 2,4,6-三硝基苯磺酸（TNBS）誘導的急性克隆氏症模式小鼠的改善作用。在TNBS誘導的結腸炎組中，可觀察到疾病活動指數（DAI）相較於對照組有顯著的上升，然而COE治療組與結腸炎組之間無顯著差異。另一方面，與結腸炎組相比，治療組的組織學活性指數（HAI）則有顯著的降低，表明 COE 降低了結腸組織的發炎反應和上皮損傷的嚴重程度。我們還分析了 TNFα、IL-1β和 IL-6 在結腸組織中和血清中的表現量。與結腸炎組相比，治療組在近端結腸組織中的TNF-α 和IL-1β 的mRNA表現量均降低。儘管COE沒有降低IL-6在結腸組織中的mRNA表現量，但IL-6在血清中的濃度則在治療組中有所降低，甚至低於對照組。此外，COE 也降低了結腸組織中的 COX-2 蛋白質表現量。總結來說，我們的研究證實了中國橄欖萃取物表現出抗發炎的能力，並具有改善 TNBS 誘導結腸炎小鼠發炎症狀的潛力，表明 COE 可能作為預防和治療發炎性腸道疾病的天然療法。未來我們將進一步評估 COE 和現有治療發炎性腸道疾病的生物製劑（如Infliximab）之協同治療是否有更好的療效。"