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http://tdr.lib.ntu.edu.tw/jspui/handle/123456789/75444
標題: | 阿拉伯芥中一具葉片細長下捲且葉柄延長等性狀之似黃素單氧化?大量表現突變株的研究 A Flavin Monooxygenase-Like Overexpression Mutant with Narrow , Down - Curling Leaf and Long Petiole Phenotypes in Arabidopsis |
作者: | 李易航 |
出版年 : | 2003 |
學位: | 碩士 |
摘要: | 葉片是植物在生長與發育過程中一個很基本和必需的器官,且其擁有相當多重要的功能。然而,對於葉片型態發生的基因及遺傳上的控制則所知甚少,原因為有許多方面的基因共同參與其中,這些因素包括光合作用、固碳作用、植物荷爾蒙及 heteroblasty 等。在此,我們利用了一個具高便利性及高效率的阿拉伯芥T-DNA knock-out 轉殖載體 pPZP202 : BAR : SK 的系統,藉由突變株的篩選及復續的分析來研究可能參與在葉部型態發生的基因。 yucca4是一個於Tl 代在葉型上就與野生型植株具顯著不同性狀的gain-of-function 突變株,包括葉片細長下捲,且葉柄延長等。經過基因釣取與比對,得知 YUCCA4 可能和已知的 YUCCA 一樣,是一個似黃素單氧化?的酵素,且參與在IAA 的生合成反應途徑中。經過基因表現的分析,發現在yucca4中,YUCCA4 被大量表現,且其性狀和先前已被研究的許多生長素過量產生的突變株類似。將YUCCA4於野生型植株中持續大量表現,可重現 yucca4 的性狀,進一步確認YUCCA4的大量表現是造成yucca4 性狀的原因 。有趣的是,於yucca4中T-DNA 嵌入點的位置位於YUCCA4基因上游約 1.7 kb 處,但本研究中所用的轉殖載體 pPZP202 : BAR : SK 並非設計來進行 activation tagging。基於上述的結果及理由 ,推論在 YUCCA4 放動子區域處有一個負調控的cis-element 存在而調節YUCCA4的表現。因此,為了驗證是否有這段調節區域的存在,我們設計並構築了不同長度的YUCCA4?動子片段進行promoter::GUS 的分析,來做為復續的研究方向。 Leaf is an essential organ with vital functions for plant growth and development, however, little is known about its genetic controls of morphogenesis because of the combination effect of genes from photosynthesis, CO2 fixation, phytohormones and heteroblasty, etc. Here we utilize a system by using a de novoT-DNA knock-out tagging vector, pPZP202:BAR:SK, with high convenience and efficiency, to identify genes that may involve in leaf morphogenesis by mutant screening and analysis. The yucca4, an Arabidopsis T-DNA tagged line, with narrow, down-curling leaf and long petiole phenotypes in T1 generation, is a gain-of-function mutant. YUCCA4 is a flavin monooxygenase (FMO)-like enzyme taking part in IAA biosynthesis as YUCCA. In yticca4 mutant, YUCCA4 is over-expressed with those phenotypes as well as other auxin-overproduction mutants described before. Constitutive overexpression of YUCCA4 in wild-type plant recapitulates the yucca4 phenotype, confirms that increased expression of YUCCA4 is responsible for the abnormal phenotype of yucca4. Interestingly, the T-DNA insertion site in this mutant is at 1.7 kb upstream of YUCCA4, but pPZP202:BAR:SK is not a vector designed for activation tagging. For this reason, we assume that there is probably a negative cis-element in promoter regulating the expression of YUCCA 4. In an attempt to identify the regulatory element, we design several promoter constructs of YUCCA 4 to carry out promoter::GUS assay in order to clarify the regulation of YUCCA 4 for further research. |
URI: | http://tdr.lib.ntu.edu.tw/jspui/handle/123456789/75444 |
全文授權: | 未授權 |
顯示於系所單位: | 植物科學研究所 |
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