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  1. NTU Theses and Dissertations Repository
  2. 生物資源暨農學院
  3. 農業化學系
請用此 Handle URI 來引用此文件: http://tdr.lib.ntu.edu.tw/jspui/handle/123456789/71732
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DC 欄位值語言
dc.contributor.advisor黃良得(Lean-Teik Ng)
dc.contributor.authorChia-I Jenen
dc.contributor.author任家宜zh_TW
dc.date.accessioned2021-06-17T06:07:59Z-
dc.date.available2024-01-17
dc.date.copyright2019-01-17
dc.date.issued2018
dc.date.submitted2018-12-27
dc.identifier.urihttp://tdr.lib.ntu.edu.tw/jspui/handle/123456789/71732-
dc.description.abstract菇類多醣體為保健產品開發的主要成分之一,其具有抗發炎、抗腫瘤及免疫調節等功效。研究指出多醣體的單醣組成、醣苷鍵鍵結形式、分支度、分子量、溶解度、螺旋結構及蛋白質含量等不同物化性質皆會影響其免疫調節活性,然而至今卻少有研究系統性地探討各種不同物化性質之多醣體的免疫調節活性差異性。本研究目的為探討五種不同物化性質之水溶性多醣體,包括烏苓參多醣 (XN)、舞菇多醣 (GF)、香菇多醣 (Len)、昆布多醣 (Lam) 與大麥β-葡聚糖 (Barley) 的抗發炎活性,並針對XN進行純化分離後,進一步探討其分離物之組成分及免疫調節活性。結果顯示在LPS誘導小鼠巨噬細胞RAW264.7發炎的模式中,單醣組成為葡萄糖的XN及Lam抑制TNF-α與IL-6分泌的效果最佳,而具有β-(1→3, 1→6)鍵結的XN、GF、Lam及Len的抑制NO生成與iNOS蛋白表現皆比β-(1→3, 1→4)鍵結的Barley效果佳,多醣體具有β-(1→3, 1→6)鍵結的XN、GF、Lam及Len能夠與Dectin-1結合,其中以Lam、XN及GF具有最佳的結合親和力。XN經純化分離後,依據分子量大小可分為F1及F2,F1為大分子量葡聚糖,分子量為885.2 kDa;而F2是由葡萄糖、半乳糖及甘露糖組成的異質性多醣,分子量為24.5 kDa及0.3 kDa。F1及F2皆能顯著抑制TNF-α、IL-6及NO的分泌,而F1則有最佳的抑制效果。F1與F2的抗發炎活性皆低於未純化之XN,故說明F1及F2之間具有協同作用。綜上所述,多醣體的物化性質中以單醣組成與醣苷鍵鍵結型態為影響抗發炎活性的主要因子,其中以葡聚糖含量及β-(1→3, 1→6)鍵結具有最佳的抗發炎活性,且Dectin-1非唯一辨認多醣體之免疫受體蛋白。XN經純化分離後的F1及F2具有不同物化性質及抗發炎活性,且兩者在活性上具有協同作用。zh_TW
dc.description.provenanceMade available in DSpace on 2021-06-17T06:07:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1
ntu-107-R05623005-1.pdf: 3919239 bytes, checksum: 22232f1452f4206e5bdfd07f6c06d072 (MD5)
Previous issue date: 2018
en
dc.description.tableofcontents目錄
謝誌 I
中文摘要 II
Abstract III
縮寫對照表 V
目錄 VI
圖目錄 X
表目錄 XII
第一章、前言 1
第二章、文獻回顧 2
2.1. 食藥用菇類 2
2.2. 菇類多醣體 4
2.2.1. 菇類多醣體之免疫調節活性 4
2.2.2. 菇類多醣體之免疫受體 5
2.3. 多醣體的物化性質 12
2.3.1. 溶解度 (solubility) 12
2.3.2. 單醣組成 (monosaccharide composition) 與醣苷鍵鍵結型態 (linkage type) 13
2.3.3. 分子量 (molecular weight) 13
2.3.4. 分支度 (degree of branching, DB) 14
2.3.5. 構型 (conformation) 14
2.3.6. 蛋白質/多肽組成 (protein/peptide component) 15
2.4. 烏苓參 17
2.4.1. 學名、俗名與分類 17
2.4.2. 產地與型態特徵 17
2.4.3. 主要成分與生物活性 17
2.4.4. 多醣體 18
2.5. 舞菇 19
2.5.1. 學名、俗名與分類 19
2.5.2. 產地與型態特徵 19
2.5.3. 多醣體 19
2.6. 香菇 22
2.6.1. 學名、俗名與分類 22
2.6.2. 產地與型態特徵 22
2.6.3. 有效成分 22
2.6.4. 多醣體 22
2.7. 昆布多醣 24
2.7.1. 學名、分類與產地 24
2.7.2. 多醣體與生物活性 24
2.8. 大麥β-葡聚糖 26
2.8.1. 多醣體的物化性質 26
2.8.2. 生物活性 26
2.9. 免疫系統 28
2.10. 巨噬細胞與免疫調節 29
2.10.1. 巨噬細胞 29
2.10.2. 脂多醣 29
2.10.3. 一氧化氮 (NO) 與誘導型一氧化氮生成酶 (iNOS) 30
2.10.4. 環氧合酶-2 (cyclooxygenase-2, COX-2) 30
2.10.5. 細胞激素 31
第三章、研究動機與目的 35
第四章、材料與方法 36
4.1. 材料及化學試劑 36
4.2. 水溶性多醣體之萃取及純化 37
4.3. 總醣含量分析 38
4.3.1. 原理 38
4.3.2. 步驟 38
4.4. 水溶性多醣體之純化與分離 39
4.5. 多醣體物化性質分析 40
4.5.1. 蛋白質含量分析 40
4.5.2. 多醣體分子量分析 40
4.5.3. 單糖組成分析 41
4.6. 細胞培養 43
4.6.1. 細胞之培養條件 43
4.6.2. 細胞之活化 43
4.6.3. 細胞之繼代培養 43
4.6.4. 細胞的凍存 44
4.7. 細胞存活率分析 (MTT assay) 45
4.7.1. 原理 45
4.7.2. 步驟 45
4.8. 一氧化氮 (nitric oxide, NO) 生成量分析 46
4.8.1. 原理 46
4.8.2. 步驟 46
4.9. 細胞激素TNF-α及IL-6之定量分析 48
4.10. iNOS及COX-2蛋白之表現量分析 50
4.10.1. 質蛋白萃取 50
4.10.2. 蛋白質定量 51
4.10.3. 蛋白質膠體電泳分析 (Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis, SDS-PAGE) 51
4.10.4. 西方墨點法 (Western blot) 51
4.11. Dectin-1親和性分析 54
4.12. 統計分析 55
第五章、結果與討論 56
5.1. 烏苓參及舞菇子實體的粗多醣體與水溶性多醣體之產率 56
5.2. 烏苓參及舞菇的水溶性多醣體之總醣含量 58
5.3. 細胞存活率 59
5.4. 促發炎介質NO之生成量 62
5.5. 細胞激素TNF-α及IL-6的分泌 64
5.6. iNOS與COX-2蛋白之表現量 68
5.7. 多醣體與Dectin-1之結合親和性 72
5.8. F1及F2之產率 74
5.9. XN、F1及F2的物化性質 77
5.9.1. 總醣與總蛋白含量 77
5.9.2. 分子量 79
5.9.3. 單醣組成 82
5.10. XN、F1及F2的細胞存活率 84
5.11. XN、F1及F2的抗發炎活性 86
第六章、結論 93
第七章、參考文獻 94
第八章、附錄 108
dc.language.isozh-TW
dc.subject物化性質zh_TW
dc.subject協同作用zh_TW
dc.subject抗發炎活性zh_TW
dc.subject烏苓參zh_TW
dc.subject多醣體zh_TW
dc.subjectpolysaccharidesen
dc.subjectphysicochemical propertiesen
dc.subjectanti-inflammatory activitiesen
dc.subjectXylaria nigripesen
dc.subjectsynergistic effecten
dc.title不同物化性質之水溶性多醣體的抗發炎活研究zh_TW
dc.titleStudy on the anti-inflammatory activities of water soluble polysaccharides with different physicochemical propertiesen
dc.typeThesis
dc.date.schoolyear107-1
dc.description.degree碩士
dc.contributor.oralexamcommittee賴敏男(Ming-Nan Lai),盧美光(Mei-Kuang Lu),廖志中(Chih-Chuang Liaw),袁國芳(Gwo-Fang Yuan)
dc.subject.keyword多醣體,物化性質,抗發炎活性,烏苓參,協同作用,zh_TW
dc.subject.keywordpolysaccharides,physicochemical properties,anti-inflammatory activities,Xylaria nigripes,synergistic effect,en
dc.relation.page110
dc.identifier.doi10.6342/NTU201804401
dc.rights.note有償授權
dc.date.accepted2018-12-27
dc.contributor.author-college生物資源暨農學院zh_TW
dc.contributor.author-dept農業化學研究所zh_TW
顯示於系所單位:農業化學系

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