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DC 欄位 | 值 | 語言 |
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dc.contributor.advisor | 李水盛(Shoei-Sheng Lee) | |
dc.contributor.author | Chen-Yu Wang | en |
dc.contributor.author | 王震宇 | zh_TW |
dc.date.accessioned | 2021-06-13T17:28:12Z | - |
dc.date.available | 2004-11-09 | |
dc.date.copyright | 2004-11-09 | |
dc.date.issued | 2004 | |
dc.date.submitted | 2004-10-27 | |
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dc.identifier.uri | http://tdr.lib.ntu.edu.tw/jspui/handle/123456789/39424 | - |
dc.description.abstract | 中文摘要
一、Retrojusticidin B在大鼠中的藥物動力學及代謝研究 Retrojusticin B分離自錫蘭葉下珠(Phyllanthus myrtifolius),在活性篩選的過程中,發現retrojusticidin B對於抑制人類免疫缺陷病毒-1型的反轉錄酶(HIV-1 reverse transcriptase)有很高的選擇性,故本實驗擬利用大鼠進行其藥物動力學及代謝的研究,以釐清其開發之潛力。先建立一簡易的分離步驟及經由Solvolysis、 | zh_TW |
dc.description.abstract | I. Pharmacokinetic and Metabolic Studies of Retrojusticidin B in Rats
The pharmacokinetics and metabolism of retrojusticidin B, an anti-HIV reverse transcriptase agent isolated from Phyllanthus myritifolius, were studied in rats. The phase II conjugated metabolites were characterized after solvolysis and enzymatic hydrolysis. The oral bioavailabilities of retrojusticidin B, suspended in Tween 80 and in corn oil, were found to be 22.1% and 33.1%, respectively. The elimination half-lives (T1/2) were 22.9 and 36.2 minutes, respectively. The T1/2, clearance, and the volume of distribution (Vz) of retrojusticidin B estimated from i.v. were 24.5 min, 2.6 ± 0.4 L/min, and 90.6 ± 6.4 L, respectively. 9,9'-Secoretrojusticidin B was proved to be phase I metabolite. II. Application of LC-SPE-NMR Hyphenated Technique i. Analysis and Identification of Lignans in Phyllanthus myrtifolius and P. urinaria Application of LC-SPE-NMR hyphenated technique in analyzing lignans of great structural similarity, present in Phyllanthus urinaria L. and P. myrtifolius Moon, was undertaken. An LC system, composed of a C8 column, eluted with THF-H2O/ MeCN and detected at 225 nm, with good resolution for 7 lignans isolated from P. urinaria was developed. An LC system, composed of a C18 column, eluted with H2O/ MeCN and detected at 280 nm, also had good resolution for 7 pure lignans from P. myrtifolius. Hyphenation of this system to SPE-NMR provided very clean 1H NMR spectra for 9 and 7 lignans present in a partially purified and lignan rich fraction of P. urinaria and P. myrtifolius, respectively. The result demonstrates that LC-SPE-NMR is a very efficient and powerful tool in thorough structural identification of natural products, at least for those known, using a minute amount of plant materials. ii. Pharmacokinetic and Metabolic Studies of TM-1 in Rats and Pigs. A study on the metabolism of TM-1 /tartaric acid IV bolus in rats showed that, within 4 hours, laurolitsine, norglaucine, glaucinone, and TM-1-1 were the major metabolites in the blood of rats, and TM-1-1-like metabolites were also detected. Analysis of the extract of urine and feces of rats, collected within 2 days after iv injection of TM-1/tartaric acid, showed that both TM-1 and its metabolites probably were eliminated through hepatic-bile duct. Pharmacokinetic study of TM-1/tartaric acid in rats IV bolus showed that its blood concentration decayed with time; and both norglaucine and TM-1-1 were the major metabolites. Tissue distribution study indicated that the highest concentration of TM-1 was observed in kidney, followed by liver and heart, and decreased with time. Pharmacokinetics of TM-1 in the domestic pig via ear vein injection, with doses of 1.28 g/ 65kg, 0.45 g/ 67 kg, and 0.14 g/ 65 kg was studied. The blood samples were picked up from jugular vein at 5, 15, 30, 60, 120, 240 and 360 (480) min sharp after injection. HPLC analysis indicated that the concentration of TM-1 in the first 5 min was much lower than that expected, and TM-1 was still detectable after 6 hours’ injection. The metabolites, however, were not detected in this study. | en |
dc.description.provenance | Made available in DSpace on 2021-06-13T17:28:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ntu-93-D88423001-1.pdf: 5229049 bytes, checksum: 6d45ff8a34c1143fde1fdfe21da3fd4e (MD5) Previous issue date: 2004 | en |
dc.description.tableofcontents | 目錄
第一部份Retrojusticidin B在大鼠中的藥物動力學及代謝研究 一、緒論及研究目的 ••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••1 1.1 緒論•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••1 1.2 研究目的•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••6 二、儀器與材料 ••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••7 2.1 理化性質測定儀器•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••7 2.2 成份分析及分離配備•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••7 2.3 試劑與溶劑•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••8 2.4 動物•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••8 三、實驗部份 3.1 建立Retrojusticidin B之HPLC分析方法•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••9 3.1.1 Retrojusticidin B之標準溶液製備•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••9 3.1.2 Retrojusticidin B各種濃度之標準溶液之製備 •••••••••••••••••••••••••••••••••••••9 3.1.3 Retrojusticidin B之HPLC分析曲線 ••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••10 3.1.4 Retrojusticidin B之血中回收實驗 •••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••10 3.1.5 Retrojusticidin B之一日內與異日間安定性試驗 •••••••••••••••••••••••••••••••11 3.1.6 β-Glucuronidase Assay 的確認 •••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••11 3.1.7 Solvolysis reaction之確認••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••11 3.2 Retrojusticidin B的體外代謝研究 ••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••12 3.2.1 誘導劑誘發大鼠肝臟微粒體之細胞色素P450同功酶 •••••••••••••••••••••12 3.2.2 大鼠肝臟S9成份製備 ••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••12 3.2.3 Retrojusticidin B在S9中之反應•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••12 3.3大白鼠口服retrojusticidin B之代謝物研究•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••13 3.3.1給藥與排泄物之收集•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••13 3.3.2分離Retrojusticidin B在大鼠尿液中之代謝物 ••••••••••••••••••••••••••••••••••13 3.3.2.1 水及正丁醇萃取物之Solvolysis反應•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••14 3.3.2.2 水及正丁醇萃取物之β-glucuronidase水解反應••••••••••••••••••••••••••14 3.3.2.3 將3.3.2.2之水層萃取物再進行Solvolysis反應•••••••••••••••••••••••••••15 3.4大白鼠IV注射retrojusticidin B之血中濃度檢測實驗••••••••••••••••••••••••••••••••15 3.4.1插管手術 •••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••15 3.4.2 給藥及取血••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••16 3.4.3 利用HPLC分析血中藥物之濃度•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••16 3.5大白鼠口服retrojusticidin B之H2O-Tween 80混懸液後血中濃度檢測 17 3.5.1給藥及取血 •••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••17 3.5.2利用HPLC分析口服後之血中藥物之濃度••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••18 3.6大白鼠口服retrojusticidin B玉米油溶液後血中濃度之檢測•••••••••••••••••••••18 3.6.1給藥及取血 •••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••18 3.6.2利用HPLC分析口服藥物玉米油溶液後之血中藥物濃度檢測••••••••••19 3.7大白鼠口服retrojusticidin B (1) 的生體可用率 ••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••20 3.8 口服給藥後大鼠的糞便中retrojusticidin B (1) 及其代謝物的分析•••••••••20 3.8.1 糞便之前處理與retrojusticidin B (1) 之含量分析 ••••••••••••••••••••••••••••20 3.8.2 Retrojusticidin B (1) 之phase II代謝分析••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••20 四、結果與討論 •••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••22 第二部份 串聯式LC-SPE-NMR技術的應用 1.分析及確認錫蘭葉下珠及葉下珠所含之木脂素成份 第一章 緒論及研究目的 ••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••33 一、緒論••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••33 1.1植物簡介••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••33 1.2植物成份研究•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••33 1.3 LC-NMR之應用••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••34 二、研究目的••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••35 第二章 實驗部份 一、儀器與材料••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••36 1.植物材料•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••36 2.成份分析及分離配備•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••36 3.試劑與溶劑••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••37 4.木脂素標準品•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••37 二、實驗部份••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••38 2.1 錫蘭葉下珠成份之抽取與分離•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••38 2.1.1 氯仿可溶部份之成份分離••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••38 2.2植物中的木脂素分析••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••42 2.2.1 葉下珠植物中的木脂素分析••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••42 2.2.2 錫蘭葉下珠植物中的木脂素分析 ••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••42 2.3 木脂素成份之HPLC分析••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••43 2.3.1 葉下珠木脂素成份之HPLC分析••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••43 2.3.2 錫蘭葉下珠木脂素成份之HPLC分析•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••44 2.4利用1H-NMR資料確認木脂素結構••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••44 第三章 結果與討論••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••45 3.1葉下珠七個木脂素標準品的HPLC分析 ••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••45 3.2 葉下珠植物中的木脂素分析 ••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••46 3.3 錫蘭葉下珠植物中的木脂素分析••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••46 3.4 葉下珠木脂素成份之HPLC分析••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••47 3.5 錫蘭葉下珠木脂素成份之HPLC分析••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••49 3.6 葉下珠中木脂素之LC-SPE-NMR分析結果••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••51 3.7 錫蘭葉下珠中木脂素之LC-SPE-NMR分析結果••••••••••••••••••••••••••••••••••••61 3.8 討論 ••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••67 第二部份 串聯式LC-SPE-NMR技術的應用 2.TM-1在大鼠及豬中之藥物動力學及代謝研究 一、緒論與研究目的•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••69 1.1 緒論•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••69 1.2研究目的••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••80 二、儀器與材料••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••80 2.1理化測定儀器•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••80 2.2 試劑•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••81 2.3 分析用設備••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••81 2.4 分析用標準品•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••81 三、實驗部份••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••83 3.1標準品溶液之配製及HPLC條件探究•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••83 3.1.1 標準溶液之配製••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••83 3.1.2 LC-MS中HPLC條件 ••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••83 3.1.3 LC-SPE-NMR及HPLC分析之條件•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••83 3.2 動物實驗部份•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••86 3.2.1 TM-1的鼠體內藥物代謝研究: •••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••86 3.2.1.1靜脈給藥後大鼠血液中之藥物含量及變化分析••••••••••••••••••••••••••86 3.2.1.1.1靜脈給藥後大鼠血液之抽取•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••86 3.2.1.1.2大鼠血液中代謝物之LC-SPE-NMR分析••••••••••••••••••••••••••••••86 3.2.1.1.3 進行十隻大鼠靜脈給藥的實驗 ••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••86 3.2.1.2大鼠尿液及糞便中排出藥物之分析••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••87 3.2.1.3分析靜脈給藥後大鼠體內組織中之藥物含量及變化 ••••••••••••••••87 3.2.2 靜脈給藥後豬血液中的藥物含量及變化 ••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••87 3.2.2.1 TM-1的HPLC定量 •••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••87 3.2.2.1.1 TM-1的標準溶液製備••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••87 3.2.2.1.2 各種濃度TM-1標準溶液之製備••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••88 3.2.2.1.3 TM-1的HPLC分析實驗••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••88 3.2.2.1.4 TM-1的血中回收實驗•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••88 3.2.2.2 TM-1在豬體內的代謝研究••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••89 3.2.2.2.1分析靜脈給藥後豬血液中的藥物含量及變化•••••••••••••••••••••••89 3.2.2.2.2豬尿液及糞便中排出藥物之分析 •••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••91 3.2.2.2.3 豬糞便及尿液中代謝物的LC-SPE-NMR分析••••••••••••••••••91 四、結果與討論 ••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••93 4.1 TM-1在大鼠體內代謝實驗結果••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••93 4.1.1 LC-MS部份••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••93 4.1.1.1 靜脈給藥後大鼠血液中的藥物含量及變化•••••••••••••••••••••••••••••••••93 4.1.1.2 大鼠尿液及糞便中排出藥物的分析••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••95 4.1.1.3 分析靜脈給藥後大鼠體內組織中的藥物含量及變化 •••••••••••••••97 4.1.2 HPLC及LC-NMR部份 ••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••99 4.1.2.1 靜脈給藥後大鼠血液中的藥物含量及變化•••••••••••••••••••••••••••••••••99 4.1.2.2 大鼠尿液及糞便中排出藥物之分析 •••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••104 4.1.2.3 分析靜脈給藥後大鼠體內組織中的藥物含量及變化•••••••••••••••105 4.2 TM-1在豬體內代謝實驗結果 ••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••105 4.2.1 靜脈給藥後豬血液中的藥物含量及變化••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••105 4.2.2 豬尿液及糞便中排出藥物的分析 ••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••109 4.3 總結•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••124 參考資料•••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••129 | |
dc.language.iso | zh-TW | |
dc.title | 一、Retrojusticidin B在大鼠中的藥物動力學及代謝研究
二、串聯式LC-SPE-NMR技術的應用 1.分析及確認錫蘭葉下珠及葉下珠所含之木脂素成份 2.TM-1在大鼠及豬中的藥物動力學及代謝研究 | zh_TW |
dc.title | I. Pharmacokinetic and Metabolic Studies of Retrojusticidin B in Rats
II. Application of LC-SPE-NMR Hyphenated Technique i. Analysis and Identification of Lignans in Phyllanthus myrtifolius and P. urinaria ii. Pharmacokinetic and Metabolic Studies of TM-1 in Rats and Pigs. | en |
dc.type | Thesis | |
dc.date.schoolyear | 93-1 | |
dc.description.degree | 博士 | |
dc.contributor.oralexamcommittee | 陳春雄,孫紹文,陳益昇,李安榮,許順吉,陳繼明 | |
dc.subject.keyword | 葉下珠,木脂素,錫蘭葉下珠, | zh_TW |
dc.subject.keyword | Retrojusticidin B,LC-SPE-NMR,TM-1, | en |
dc.relation.page | 141 | |
dc.rights.note | 有償授權 | |
dc.date.accepted | 2004-10-28 | |
dc.contributor.author-college | 醫學院 | zh_TW |
dc.contributor.author-dept | 藥學研究所 | zh_TW |
顯示於系所單位: | 藥學系 |
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