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  1. NTU Theses and Dissertations Repository
  2. 生物資源暨農學院
  3. 獸醫專業學院
  4. 獸醫學系
請用此 Handle URI 來引用此文件: http://tdr.lib.ntu.edu.tw/jspui/handle/123456789/29140
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DC 欄位值語言
dc.contributor.advisor陳媺玫(Meei-Mei Chen)
dc.contributor.authorCheng-Chih Hsuen
dc.contributor.author許承智zh_TW
dc.date.accessioned2021-06-13T00:42:29Z-
dc.date.available2011-08-12
dc.date.copyright2011-08-12
dc.date.issued2011
dc.date.submitted2011-08-04
dc.identifier.urihttp://tdr.lib.ntu.edu.tw/jspui/handle/123456789/29140-
dc.description.abstract水產動物分離鏈球菌科細菌對台灣的養殖漁業造成嚴重的經濟損失,並引起敗血症、高死亡率的爆發,亦可呈現慢性不顯性的感染。但隨著使用藥物治療,抗藥性問題也漸漸產生。本研究收集來自於不同地區的魚類鏈球菌爆發病例共61株,對魚種分離年分來源做紀錄,使用根據生化性狀鑑定的API 20 Strep和16s rDNA定序將種別做鑑定,並將菌株進行紙錠擴散法和最小濃度測量以及抗藥性基因的聚合酶鏈鎖反應,以了解其收集菌株的抗微生物敏感性試驗和其機制。收集的菌株結果種別佔最大宗的為Lactococcus. garvieae,共有30株(49%)、Streptococcs iniae有20株(32%)、Streptococcus agalactiae有6株(9.8%),3株Lactococcus lactis (4.9%)、Streptococcus dysgalactiae 1株(1.6%)和Enterococcus faecalis 1株(1.6%)。在Tetracycline部分,發現有26株呈現抵抗性皆攜帶有tet(S),MIC值高達256 μg/mL以上,26株中有24株為L. garvieae,1株為L. lactis subsp. lactis,1株為Lactococcus lactis subsp. cremoris。其中編號970715(L. lactis subsp. lactis)同時擁有Tetracycline>256μg/mL,Erythomycin >256 μg/mL的MIC值。將之質體抽出進行分析、南方雜合將抗藥性基因定位,並用接合作用探討抗藥性基因的傳遞性。編號910723-2的Lactococcus lactis subsp. cremoris有一大小為3 kbp的質體,其tet(S)位於染色體上。編號970715的 L. lactis subsp. lactis有4個大小分別為23、15、12、9大小的質體,經由切膠偵測抗藥性基因tet(S)和erm(B)皆在質體上,選用Enterococcus faecalis當接受者,可在接合作用下共同傳遞抗藥性基因。24株L. garvieae皆有一大小為21 kbp的質體,選取5株亦可在接合作用下傳遞抗藥性基因tet(S)給E. faecalis。但選取無抗藥性質體的L. garvieae當接受者做接合作用,僅3株在接合作用下傳遞抗藥性基因tet(S)。zh_TW
dc.description.provenanceMade available in DSpace on 2021-06-13T00:42:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1
ntu-100-R98629016-1.pdf: 2238840 bytes, checksum: 731acf05284e4664b4a62d2526543c95 (MD5)
Previous issue date: 2011
en
dc.description.tableofcontents第一章 緒論 1
第二章 文獻回顧 3
第一節 魚類鏈球菌病 3
1.1 常見魚類鏈球菌種類及生化特性、型態學和流行情形 3
1.2 防治、治療與控制 12
1.3 台灣水產鏈球菌抗藥性調查 15
第二節 抗藥性及基因傳遞方式 15
2.1 紅黴素抗菌劑 15
2.2 四環黴素類抗菌劑 17
2.3 紅黴素抗藥性產生機制 19
2.4 革蘭氏陽性菌與陰性菌四環黴素抗藥性機制 21
2.5 水產鏈球菌常見四環黴素與紅黴素抗藥性基因 27
2.6 抗藥性基因與傳遞 28
第三章 材料方法 30
第一節 實驗設計及流程 30
第二節 水產動物來源鏈球菌株收集與菌株鑑定 31
2.1 實驗材料 31
2.2 實驗方法 32
第三節 藥物感受性試驗-紙錠擴散法 (Disc diffusion) 34
3.1 實驗材料 34
3.2 實驗方法 35
第四節 最小抑制濃度(Minimal inhibitory concentration)測量-微量肉湯稀釋(Broth microdilution assay)感受性試驗 35
4.1 實驗材料 35
4.2 實驗方法 36
第五節 聚合酶鏈鎖反應偵測抗藥性基因 37
5.1 實驗材料 37
5.2 實驗方法 38
第六節 鏈球菌質體抽取與分析 39
6.1 實驗材料 39
6.2 實驗方法 41
第七節 南方墨點法(Southern blot) 43
7.1 實驗材料 43
7.2 實驗方法 45
第八節 接合反應(Conjugation)和電穿孔(Electroporation) 47
8.1 實驗材料 47
8.2 實驗方法 Filter mating 47
第九節 使用Mega5 軟體進行親源分析 49
第四章 實驗結果 50
第一節 菌株種別鑑定 50
第二節 紙錠擴散法結果 50
第三節 最小抑菌濃度與抗藥性基因偵測 51
第四節 質體圖譜分析 52
第五節 南方雜合結果 52
第六節 接合作用 52
第七節 Mega5軟體分析 53
第五章 討論 54
第一節 魚種來源 54
第二節 菌株鑑定 55
第三節 紙錠擴散法 56
第四節 最小抑菌濃度測量與抗藥性基因偵測 58
第五節 質體分析與南方雜合 59
第六節 接合作用 61
第六章 參考文獻 85
dc.language.isozh-TW
dc.subject鏈球菌zh_TW
dc.subject抗藥性zh_TW
dc.subjectstreptococcusen
dc.subjectresistanten
dc.title台灣水產動物分離鏈球菌株對四環黴素與紅黴素抗藥性基因之調查與分析zh_TW
dc.titleDrug Resistant Determinant of Erythromycin- and Tetracycline-Resistant Streptococcus and Lactococcus Isolated from Aquatic Animals in Taiwanen
dc.typeThesis
dc.date.schoolyear99-2
dc.description.degree碩士
dc.contributor.oralexamcommittee張本恆(Pen-Heng Chang),謝嘉裕(Chia-Yu Hsieh),涂堅(Chien Tu)
dc.subject.keyword抗藥性,鏈球菌,zh_TW
dc.subject.keywordresistant,streptococcus,en
dc.relation.page108
dc.rights.note有償授權
dc.date.accepted2011-08-04
dc.contributor.author-college獸醫專業學院zh_TW
dc.contributor.author-dept獸醫學研究所zh_TW
顯示於系所單位:獸醫學系

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