實現高效率的AAV感染在人類primary NK細胞上

Abstract

在人體細胞中標準且有效傳遞轉基因的方式是利用病毒載體進行轉導。然而，由於自然殺手細胞對於病毒感染和外源DNA具有一定的抗性，導致病毒載體的轉導效率不佳且沒有一致性。逆轉錄病毒和慢病毒是僅有可以轉導自然殺手細胞表達轉基因的病毒，但需要高感染複數並且存在插入突變的風險。腺相關病毒是有前瞻性的替代品，因為它的安全性已在臨床環境中得到證實。一份文獻表明腺相關病毒血清型6在自然殺手細胞的高效使用，但我們實驗是和其他團隊無法重現他們的結果。在NK-92細胞株中，需要非常高的感染複數才能看到腺相關病毒血清型6轉導訊號；在初代自然殺手細胞則完全無法轉導。為了瞭解和克服腺相關病毒轉導的侷限性，我開始研究腺相關病毒附著和進入自然殺手細胞後可能引起的機制。我發現腺相關病毒受體在不同細胞型態有表達量和分子量的差異，以及我透過抑制劑研究了DNA傳感器的重要性，但是這兩種因素並非腺相關病毒無法轉導自然殺手細胞的主要機制。 最後，我證實腺相關病毒血清型9以及腺相關病毒血清型DJ能在初代自然殺手細胞有接近2%轉基因的表達，這是在先前研究中尚未有人報導的特性。探討腺相關病毒血清型適性以及細胞內抑制轉導的機制對於在具有臨床價值的自然殺手細胞實現強大的轉導是必要的。