大肚魚細胞株之建立及其生物學特性之研究

Abstract

本實驗的目的，在於建立大肚魚（Top-minnow）之細胞株，並對此細胞株進行一些生物學特性之研究。 此細胞株在含10％牛犢血清的Leibovitz's L-15培養液中，於31℃的條件之下已繼代培養了84次，並命名為TM。細胞之形態呈纖維母細胞狀，表面附著效率值約為11.7％，分析48代及60代分裂中期細胞的染色體數目，顯示其分佈在21到68之間，而以含38個染色體的細胞最多。TM細胞之生長在一定的限度之內會隨著血清濃度的增加而上昇，在完全不含血清的培養液中，生長停頓，細胞甚至不會附著在培養瓶上。TM細胞經過一段時間的培養後，細胞會形成單層細胞層（monolayer），而不會有重疊或堆積成塊的現象，表示此細胞具有接觸性抑制作用（contact inhibition），證明此細胞並未變性（Transformation）。掃描式電子顯微鏡下觀察TM細胞的表面微細形態，顯示在正常狀況下的細胞在表面會生出許多的微絨毛（microvilli），這些微絨毛長度很長，當環境欠佳或細胞老化時，微絨毛會漸漸變短，進而被一些乳狀突起（bleb）所取代，而後此乳狀突起亦會消失，細胞會有凹陷、穿孔的現象，最後細胞發生自體溶解（autolysis）。 實驗顯示TM細胞對於魚類病毒EVE、EVEX、EVA、IPNV及LV-1均具有感受性，而且複製量很高，在經過液態氮長期的保存下，仍具有很好的生存能力，TM細胞經過鑑定沒有細菌、?菌及黴漿菌（mycoplasma）的感染。