請用此 Handle URI 來引用此文件:
http://tdr.lib.ntu.edu.tw/jspui/handle/123456789/75466
標題: | 鯉魚睪丸3β-羥基固酮激素脫氫?-△4、△5異構?活性之研究 STUDY OF CARP TESTICULAR 3β-HYDROXYSTEROID DEHYDROGENASE/△4、△5-ISOMERASE ACTIVITY |
作者: | Yun-Chia Chou 周韻家 |
出版年 : | 1983 |
學位: | 碩士 |
摘要: | 一、中文摘要………………1 二、緒言……………………3 三、材料與方法…………………7 1. 3β-HSD/isomerase之製備…7 2. 酵素活性之測定…………8 3. 蛋白質濃度之測定……11 4. 化學藥品………………12 四、結果…………………13 1. 3β-HSD/isomerase在睾丸細胞內之分佈……13 2. 溫度對3β-HSD/isomerase活性的效應………13 3. 3β-HSD/isomerase之反應時序……………17 4. PH值對3β-HSD/isomerase活性的效應…………17 5. 3β-HSD/isomerase之受質專一性…………………17 6. 3β-HSD/isomerase之量與?物生成量之關係………24 7. NAD與NADP對3β-HSD/isomerase活性效應的比較…27 8. 3β-HSD/isomerase之屬性………27 9. Cyanoketone對3β-HSD/isomerase之抑制作用…31 五、討論……………………………39 六、英文摘要………………………48 七、參考文獻………………………50 經由胞器分層法,發現鯉魚睾丸組織之粒線體,微粒體及胞液均含3β-羥基固酮激素脫氫?-△4、△5異構?(3β-Hydroxysteroid dehydrogenase/△4、△5-isomerase,簡稱3β-HSD/isomerase)。基中以微粒體之比活性最高,次?粒線體,胞液最低。因此本實驗以Triton x-100萃取微粒體之3β-HSD/isomerase,利用Nitro blue tetragolium呈色反應法,薄層色層分析法(TLC)及高壓液態色層分析法(HPLC)測定?之活性,研究鯉魚睾丸中3β-HSD/isomerase之諸種性質。 當以粒線體,微粒體及胞液三部分??原時,Pregnenolone的受質效率最高,但經Triton x-100萃取微粒體所得到的3β-HSD/isomerase,Pregnenolone的受質效率則大?降低。 3β-HSD/isomerase之最適宜作用溫度?35℃,PH值?7.2-9.2。由此?作用所?生的?物,會隨反應時間之增長而增加,到第4小時便違平臺。?之含量與?物之生成量?正相關,此?可利用NAD及NADP,但NADP之效率較差。此?以Dehydroepiandrosterone?受質時之Km?5.76μM,最大反應速率(Vmax)?1.95×10-1 nmole/mg protein min,以Pregnenolone?受質時之Km?18.30μM,最大反應速率?1.91×10-2 nmole/mg protein min。Cyanoketone可抑制此?之作用。 本實驗除以睾丸?材料,研究3β-HSD/isomerase在細胞內之分佈及受質專一性外,還以頭腎組織?材料,研究3β-HSD/isomerase在細胞內之分佈及受質專一性。在頭腎組織中,粒線體、微粒體及胞液均含此?,其中亦以微粒體之比活性最高。與睾丸比較起來,在頭腎組織中,以17α-Hydroxypre-gnenolone之受質效率最高。 |
URI: | http://tdr.lib.ntu.edu.tw/jspui/handle/123456789/75466 |
全文授權: | 未授權 |
顯示於系所單位: | 動物學研究所 |
文件中的檔案:
沒有與此文件相關的檔案。
系統中的文件,除了特別指名其著作權條款之外,均受到著作權保護,並且保留所有的權利。