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DC 欄位 | 值 | 語言 |
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dc.contributor.advisor | 王金和 | |
dc.contributor.author | Hsin-Fu Tsai | en |
dc.contributor.author | 蔡欣甫 | zh_TW |
dc.date.accessioned | 2021-06-16T06:33:41Z | - |
dc.date.available | 2016-08-08 | |
dc.date.copyright | 2014-08-08 | |
dc.date.issued | 2014 | |
dc.date.submitted | 2014-08-04 | |
dc.identifier.uri | http://tdr.lib.ntu.edu.tw/jspui/handle/123456789/57049 | - |
dc.description.abstract | 家禽傳染性支氣管炎是一種高度傳染性的病毒性疾病,主要在雞造成感染。由於此病毒很容易因自發性突變及基因重組而改變,因此世界上有許多不同的毒株。本研究為探討最近傳染性支氣管炎在台灣雞場的盛行率及的基因型。白肉雞樣本為屠宰場採樣之檢體,每場隨機取樣20隻肉雞之氣管進行調查;土雞場樣本為現場疑似病例之檢體,採集疑似發病土雞之氣管進行調查。以反轉錄聚合酶鏈鎖反應檢測是否有病毒感染,再以針對傳染性支氣管炎S1基因上N端HVR1的引子進行反轉錄聚合酶鏈鎖反應,並進行核酸定序及序列分析。結果在台灣2012年11月至2014年1月間之屠宰場隨機採樣場陽性率為39.4%(26/66),且以台灣二型為主要流行之毒株。序列分析後可發現除了台灣毒株及疫苗毒株外,也檢測到之前未在台灣檢測到之類日本毒株,然而此類日本毒株之N基因卻與台灣型毒株較相近。以100-191隻血清進行測試,並以HI test作為標準,評估商品化ELISA套組之可信度。以3263/04之HI test為標準,商品化ELISA之敏感度為43.6%,特異度為92.1%;而以H120之HI test為標準,商品化ELISA之敏感度則為33.8%,特異度為90.6%。本研究結果顯示,台灣IBV毒株基因變異有趨向多樣化的現象。 | zh_TW |
dc.description.abstract | Avian infectious bronchitis (IB) is a highly contagious viral disease of the chicken. Because IBV can change its genome by spontaneous mutation and genetic recombination easily, many strains emerge all over the world. This study investigated the prevalence and genotypes of IBVs in Taiwan recently. The samples of broilers were collected from poultry slaughter houses and the Taiwan Country chickens from IBV suspected case in the fields. IBV in samples were detected by reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR) and grouped based on HVR1 in S1 sequence analysis. The result showed that the prevalence in poultry slaughter houses in Taiwan from November 2012 to January 2014 was 39.4% (26/66) with TW-II predominantly. The phylogenetic tree analysis showed that some Japan-like strains were detected besides Taiwan strains and vaccine strains. However, the N genes of those Japan-like strains were grouped into Taiwan strains. The 100-191 serum samples from fields were used to evaluate the relationship between HI test and a commercial ELISA kit. Base on HI result using 3263/04 as an antigen, the sensitivity and specificity of the commercial ELISA kit were 43.6% and 92.1%, respectively and 33.8% and 90.6%, respectively base on HI result using H120 as an antigen. The result of this study showed that the genetic variants of IBV have appeared in Taiwan. | en |
dc.description.provenance | Made available in DSpace on 2021-06-16T06:33:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ntu-103-R01629010-1.pdf: 3196949 bytes, checksum: 79b05f8ed37d66bc3c61a1ce199e0ccc (MD5) Previous issue date: 2014 | en |
dc.description.tableofcontents | 口試委員會審定書 i
致謝 ii 摘要 iv Abstract v 目錄 vi 表次 x 圖次 xi 第一章 序言 1 第二章 文獻探討 3 第一節 傳染性支氣管炎病毒歷史背景 3 第二節 傳染性支氣管炎病毒之病原學 4 2-2.1 病毒分類 4 2-2.2 病毒型態 5 2-2.3 病毒結構與其功能 6 2-2.3.1 病毒基因體 6 2-2.3.2 棘突醣蛋白(Spike glycoprotein,S) 7 2-2.3.3封套蛋白(Envelope protein,E) 9 2-2.3.4 基質醣蛋白(Matrix glycoprotein,M) 10 2-2.3.5 核殼蛋白(Nucleocapsid protein,N) 10 2-2.3.6 非結構蛋白(Non-structural proteins, nsp) 11 第三節 傳染性支氣管炎病毒之病原性與致病機制 11 2-3.1 病毒宿主範圍 11 2-3.2 病毒傳播 12 2-3.3 病毒複製 12 2-3.4 病毒致病機制 13 2-3.5 臨床症狀與病理變化 13 第四節 傳染性支氣管炎之實驗室診斷 15 2-4.1 病毒檢測 15 2-4.1.1 病毒分離 15 2-4.1.2 抗原捕捉法 16 2-4.1.3 病毒核酸偵測 16 2-4.2 病毒血清學檢測 17 2-4.2.1 病毒中和試驗(Virus neutralization) 17 2-4.2.2 血球凝集抑制試驗(Haemagglutination inhibition) 18 2-4.2.3 酵素連結免疫吸附法(enzyme-linked-immunosorbent assay;ELISA) 18 2-4.2.4 瓊脂膠體沉澱法(agar gel precipitin test;AGPT) 19 第五節 傳染性支氣管炎之預防與控制 19 2-5.1 死毒疫苗 20 2-5.2 活毒疫苗 20 2-5.3 次單位疫苗 21 第六節 傳染性支氣管炎在台灣之現況 22 第三章 材料與方法 24 第一節 樣本採集 24 3-1.1 肉雞場樣本採集及製備 24 3-1.2 土雞場樣本採集及製備 24 3-1.3 核酸萃取 24 3-1.4 傳染性支氣管炎核酸檢測之反轉錄聚合酶鏈鎖反應 25 3-1.5 傳染性支氣管炎核酸檢測之反轉錄聚合酶鏈鎖反應產物分析 26 3-1.6 傳染性支氣管炎陽性率統計及統計分析 26 第二節 傳染性支氣管炎基因核酸定序及序列分析 27 3-2.1 S1高變異區基因之反轉錄聚合酶鏈鎖反應 27 3-2.2 傳染性支氣管炎之核酸定序及序列分析 28 第三節 傳染性支氣管炎之抗體分析 28 3-3.1 病毒增殖 28 3-3.2 樣本來源 30 3-3.3 血球凝集抑制試驗(Haemagglutination-inhibition Test, HI test) 30 3-3.3.1 血球凝集抑制試驗之抗原製備 30 3-3.3.2 血球凝集試驗 31 3-3.3.3 血球凝集抑制試驗 31 3-3.4 傳染性支氣管炎之血清陽性率統計及統計分析 32 第四節 傳染性支氣管炎類日本毒株(Japan-like IBV)分析 32 3-4.1 病毒分離 32 3-4.2 完整S1基因之反轉錄聚合酶鏈鎖反應及分析 34 3-4.3 病毒與血清力價 35 3-4.4 單向中和試驗 36 3-4.5 測試RT-PCR是否可用來檢測中和試驗 36 第四章 結果 37 第一節 傳染性支氣管炎之盛行率調查 37 第二節 傳染性支氣管炎基因核酸定序及序列分析 37 4-2.1 傳染性支氣管炎N基因之親緣樹分析 37 4-2.2 傳染性支氣管炎S1變異區基因之親緣樹分析 38 第三節 傳染性支氣管炎之抗體分析 39 4-3.1 血球凝集抑制試驗結果分析 39 第四節 類日本型毒株分離及分析 40 4-4.1 病毒分離結果 40 4-4.2 完整S1基因及胺基酸序列分析 40 4-4.3 病毒力價 40 4-4.4 單向中和試驗 41 4-4.5 測試RT-PCR是否可用來檢測中和試驗 42 第五章 討論 43 參考文獻 50 | |
dc.language.iso | zh-TW | |
dc.title | 傳染性支氣管炎病毒序列分析及血清學檢測 | zh_TW |
dc.title | Sequence Analysis and Serological Detection of Infectious Bronchitis Virus | en |
dc.type | Thesis | |
dc.date.schoolyear | 102-2 | |
dc.description.degree | 碩士 | |
dc.contributor.oralexamcommittee | 謝快樂,沈瑞鴻,張伯俊,陳慧文 | |
dc.subject.keyword | 傳染性支氣管炎,台灣,序列分析,基因型, | zh_TW |
dc.subject.keyword | Infectious bronchitis,Taiwan,sequence analysis,genotype, | en |
dc.relation.page | 92 | |
dc.rights.note | 有償授權 | |
dc.date.accepted | 2014-08-04 | |
dc.contributor.author-college | 獸醫專業學院 | zh_TW |
dc.contributor.author-dept | 獸醫學研究所 | zh_TW |
顯示於系所單位: | 獸醫學系 |
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