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DC 欄位 | 值 | 語言 |
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dc.contributor.advisor | 于宏燦(Hon-Tsen Yu) | |
dc.contributor.author | Yu-Hsi Yang | en |
dc.contributor.author | 楊玉璽 | zh_TW |
dc.date.accessioned | 2021-06-15T05:16:12Z | - |
dc.date.available | 2010-07-23 | |
dc.date.copyright | 2010-07-23 | |
dc.date.issued | 2010 | |
dc.date.submitted | 2010-07-21 | |
dc.identifier.citation | 參考文獻
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dc.identifier.uri | http://tdr.lib.ntu.edu.tw/jspui/handle/123456789/46570 | - |
dc.description.abstract | 摘要
本研究使用元素硫氧化培養基,由陽明山區小油坑池水 (泉溫為 71.6℃,酸鹼值為 2.36)沈積物中,培養並分離出一株元素硫氧化菌 (SYK-ESO-1),經過16S rDNA鑑定,屬於 Acidianus 屬,與 Acidianus manzaensis strain NA-1 及 Acidianus manzaensis strain TA均有 99% 的相似度。此菌株可生長酸鹼值為 0.0-5.0 之間 (最適酸鹼值為 2),可生長溫度範圍為 50-85℃ (最適溫度為 82℃),可生長在 0.0-10.0 ‰ 的 NaCl 濃度中(最適NaCl濃度為1.67‰)。細胞為直徑 0.5-2.2μm 的不規則球型。耗氧情況可氧化元素硫自營生長、或使用有機物行異營生長,亦可以有機混合物 (meat peptone、tryptone、yeast extract或starch) 或多醣類 (葡萄糖 (glucose)、蔗糖 (sucrose)、甘露糖 (mannose)、乳糖 (lactose) 、丙酮酸 (pyruvate)) 做為單一碳源。在厭氧條件下,三價鐵、硝酸、亞硝酸、硫酸及元素硫均無法做為電子接受者,以供此菌株生長。此株氧化元素硫生長時,硫酸根的產生在細胞生長延遲期即呈指數上升,到了細胞指數期後半則線性上升,而在高原期維持相同的速率。生長溫度越高,硫酸根產生速率越快;酸鹼值對硫酸根產生影響極大,只在最適酸鹼值的狹小範圍內硫酸根才能大幅產生;而氯化鈉濃度對硫酸根產生速率影響較小,僅在氯化鈉濃度上限 10 ‰ 有產率上升的現象。 | zh_TW |
dc.description.abstract | Abstract
A thermoacidophilic sulfur-oxidizing Archaea, strain SYK-ESO-1, was isolated from a hot spring in Shauyuken (71.6℃, pH 2.36), Yangminshan. On the basis of 16S rDNA analysis, strain SYK-ESO-1 is affiliated with Acidianus manzaensis strain NA-1 and Acidianus manzaensis strain TA at a similarity of 99 %. The range of growth temperature, pH and NaCl concentration are 50-85℃ (optimum at 82℃), 0.0-5.0 (optimum at pH= 2.0), 0-10 ‰ (optimum at 1.67 ‰), respectively. The cells are irregular cocci. Strain SYK-ESO-1 is aerobic and can grow autotrophically using S0 as an electron donor and heterotrophically using some organic compounds. Fe3+, NO3-, NO2-, SO42- and S0 do not serve as electron acceptor under anaerobic condition. When the strain lives on sulfur oxidation, sulfate production increases exponentially, while cell growth is still in lag phase. While the growth is in log phase, sulfate production increases linearly. Sulfate production rates also elevate with the increase of temperature. Cells produce sulfate only in a narrow range around optimum pH. The influence of NaCl concentration on sulfate production rate is minor, and sulfate production rate raises only in upper limit concetraction 10 ‰. | en |
dc.description.provenance | Made available in DSpace on 2021-06-15T05:16:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ntu-99-R93b41014-1.pdf: 2289037 bytes, checksum: 662e21dd38f5446c766a98df33f7c600 (MD5) Previous issue date: 2010 | en |
dc.description.tableofcontents | 目 錄
第一章 緒論 1 1. 前言 1 2. 研究動機 1 3. 富化培養與分離鑑定 2 3-1 營養方式與富化培養 2 3-2 原核生物鑑定 3 4. 溫泉菌培養與分離研究 5 4-1 嗜熱微生物 5 4-2 嗜酸性微生物 6 4-3 硫氧化微生物 7 4-4 大屯火山群已分離之溫泉菌 9 第二章 材料方法 10 1. 採樣地點 10 2. 取樣方法 10 3. 富化培養與純化 10 3-1 培養基配方 10 3-2 富化培養生長觀察 11 3-2-1 相位差顯微鏡觀察 11 3-2-2 螢光染色 11 3-2-3 計數 12 3-3 純化 12 3-3-1 固態培養基鋪盤法 12 3-3-2 浮舟培養法 13 3-3-3 序列稀釋 13 4. 分子鑑定 13 4-1 DNA萃取 13 4-2 PCR放大16S rDNA 14 4-3 定序與親緣關係分析 14 5. 生化與生理測試 15 5-1 生理特性測試 15 5-1-1 可生長溫度測試 15 5-1-2 可生長氯化鈉濃度測試 15 5-1-3 可生長酸鹼度測試 15 5-1-4 碳源利用、電子接受者及電子提供者測試 16 5-2 受質與代謝物產量之測量 19 5-2-1 硫酸根離子的測量 19 5-2-2 二價鐵離子的測量 19 5-3 差異性染色 20 5-3-1 革蘭氏染色 20 5-3-2 內孢子染色 20 5-3-3 PHB染色 21 5-4 抗生素耐受性測試 21 6. 細胞倍增時間 21 第三章 結果 22 1. 分子鑑定 22 1-1 DNA萃取 22 1-2 菌種 16S rDNA 序列鑑定 22 2. 分離株型態描述 30 3. 菌株生理特性測試 30 3-1 生長溫度、酸鹼度、氯化鈉濃度範圍 30 3-1-1 生長溫度上下限與最適生長溫度 30 3-1-2 生長酸鹼度上下限與最適生長酸鹼度 31 3-1-3 最適生長鹽度(氯化鈉含量) 32 3-2 不同生長條件對硫酸根產生的影響 33 3-2-1 溫度對硫酸根產量的影響 34 3-2-2 酸鹼度對硫酸根產量的影響 37 3-2-3 氯化鈉濃度對硫酸根產量的影響 40 3-3 電子接受者與電子提供者測試 43 3-4 單一碳源利用測試 43 3-5 抗生素測試 48 第四章 討論 50 1. 分離株與親源關係近似株之比較 50 2. 嗜酸熱微生物之培養與分離策略 56 3. 與現地分子生物資料之比對 57 4. 與現地化學資料之比對 58 5. 最適生長溫度與生長溫度範圍 59 6. 細胞生長與硫酸根產生關係 60 6-1 溫度對硫酸根累積的影響 63 6-2 酸鹼度對硫酸根累積的影響 65 6-3 氯化鈉濃度對硫酸根累積的影響 66 結論 67 參考文獻 68 圖目錄 圖 3-1、16S rDNA親緣關係圖。 23 圖 3-2、SYK-ESO-1 之電子顯微鏡照。 27 圖 3-3、SYK-ESO-1 之相位差顯微鏡照。 28 圖 3-4、培養後培養基外觀。 29 圖 3-5、細胞倍增時間受溫度培養的影響。 31 圖 3-6、細胞倍增時間受酸鹼度的影響情形。 32 圖 3-7、細胞倍增時間受氯化鈉濃度的影響。 33 圖 3-8、單一細胞硫酸根產生速率受溫度的影響情形。 35 圖 3-9、硫酸根產生倍增時間受溫度影響情形。 36 圖3-10、單一細胞硫酸根產生速率受酸鹼度影響情形。 38 圖3-11、硫酸根倍增時間受酸鹼度影響情形。 39 圖 3-12、單一細胞硫酸根產生速率受氯化鈉濃度的影響情形。 41 圖4-1、生長速率開根號與溫度關係圖。 60 圖4-2、微生物在封閉環境中之生長曲線。 61 圖 4-3、封閉培養硫酸根濃度隨時間變化的情形。 61 圖 4-4、封閉培養細胞濃度與硫酸根濃度隨時間的變化情形。 62 圖 4-5、封閉培養細胞濃度與硫酸根濃度之對數隨時間的變化情形。 62 圖 4-6、SYK-ESO-1 最適狀態細胞濃度與硫酸根濃度隨時間變化圖。 63 附圖一、細胞生長/硫酸根產生受溫度的影響情形。 76 附圖二、細胞生長/硫酸根產生受酸鹼度的影響情形。 78 附圖三、細胞生長/硫酸根產生受氯化鈉濃度的影響情形。 80 附圖四、細胞生長與硫酸根產生受溫度影響情形。 81 表目錄 表 3-1、16S rDNA 序列比對。 24 表 3-2、SYK-ESO-1之化合代謝測試結果。 44 表 3-3、SYK-ESO-1對有機物的使用測試結果。 45 表 3-4、SYK-ESO-1 三種代謝的比較。 47 表 3-5、SYK-ESO-1 對抗生素的抗性測試結果。 49 表 4-1、SYK-ESO-1 近似菌株生理特性之比較。 51 表 4-2、SYK-ESO-1同屬物種之化合代謝方式比較。 53 表 4-3、對有機物的使用:與 Acidianus 屬內物種比較。 54 附表一、元素硫還原菌培養基預設代謝 83 附表二、鐵氧化菌培養基預設代謝 83 附表三、元素硫氧化菌培養基預設代謝 83 附表四、基礎鹽類配方 84 附表五、微量元素配方 84 附表六、維生素配方 85 附表七、元素硫還原培養液成分 86 附表八、元素硫氧化培養液成分 86 附表九、二價鐵氧化培養液成分 87 附表十、PCR 與定序引子 87 附表十一、三價鐵還原培養基預設代謝 88 附表十二、三價鐵還原培養液成分 88 附表十三、硝酸還原培養基預設代謝 88 附表十四、硝酸還原培養液成分 89 附表十五、亞硝酸還原培養基預設代謝 89 附表十六、亞硝酸還原培養液成分 90 附表十七、硫酸還原培養基預設代謝 90 附表十八、硫酸還原培養液成分 91 附表十九、緩衝溶液 A 91 附表二十、不同溫度下各取樣時間點細胞生長數量 92 附表二十一、不同酸鹼度下各取樣時間點細胞生長數量 99 附表二十二、不同鹽度下各取樣時間點細胞生長數量 106 | |
dc.language.iso | zh-TW | |
dc.title | 酸性熱泉水中元素硫氧化菌之分離培養與代謝分析 | zh_TW |
dc.title | Isolation and metabolism of
elemental sulfur oxidation microbes in acidic hot spring | en |
dc.type | Thesis | |
dc.date.schoolyear | 98-2 | |
dc.description.degree | 碩士 | |
dc.contributor.coadvisor | 王珮玲(Pei-Ling Wang) | |
dc.contributor.oralexamcommittee | 羅竹芳(Chu-Fang Lo),黃曉葳(Shiao-Wei Huang) | |
dc.subject.keyword | 元素硫氧化菌,古菌,嗜酸菌,嗜熱菌, | zh_TW |
dc.subject.keyword | molecular sulfur oxidation microbes,Archaea,acidophiles,thermophiles, | en |
dc.relation.page | 112 | |
dc.rights.note | 有償授權 | |
dc.date.accepted | 2010-07-22 | |
dc.contributor.author-college | 生命科學院 | zh_TW |
dc.contributor.author-dept | 動物學研究所 | zh_TW |
顯示於系所單位: | 動物學研究所 |
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