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http://tdr.lib.ntu.edu.tw/jspui/handle/123456789/29079
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DC 欄位 | 值 | 語言 |
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dc.contributor.advisor | 朱瑞民 | |
dc.contributor.author | Yi-Chun Huang | en |
dc.contributor.author | 黃逸君 | zh_TW |
dc.date.accessioned | 2021-06-13T00:38:45Z | - |
dc.date.available | 2008-07-30 | |
dc.date.copyright | 2007-07-30 | |
dc.date.issued | 2007 | |
dc.date.submitted | 2007-07-25 | |
dc.identifier.uri | http://tdr.lib.ntu.edu.tw/jspui/handle/123456789/29079 | - |
dc.description.abstract | 自然殺手細胞(natural killer cells, NKC)是先天免疫系統中的重要角色,可在未經刺激的情形下毒殺MHC class I表現不正常之病毒感染及腫瘤細胞。NKC之作用最主要是來自其表面抑制型與活化型接受器之調控。NKC在人、小鼠、大鼠、豬和牛等物種有許多研究與結果,但是在犬方面,仍無相關的報告可以提供NKC之特異性接受器或抗原之資訊。本實驗室先前之實驗發現犬週邊血液淋巴球中CD5陽性之細胞可分為低度表現CD5的細胞 ( CD5lo,CD5 low density )和高度表現CD5的細胞 ( CD5hi,CD5 high density )。由於我們於光學及電子顯微鏡下觀察發現CD5lo細胞在IL-2激化後較CD5hi細胞大,並於細胞質中有較多量的大型顆粒。因此我們進一步研究並證實CD5lo細胞在IL-2激化後對CTAC細胞株(犬NKC之標的細胞)有很強的毒殺能力。除此之外,藉由定量RT-PCR的方法,我們發現CD5lo PBL較CD5hi PBL表現較高量的NKC相關基因包括NKG2D、CD16、CD94、CD160、peforin和granzyme B。在IL-2激化後CD5lo細胞較CD5hi細胞表現較高量的NKC相關基因包括NKp30、NKp44、CD16和CD94。綜合上述結果,我們認為CD5lo細胞族群與犬NKC具有密切的關係。此論文乃第一篇針對犬CD5lo細胞進行詳盡的研究及報告並對未來犬NKC的研究有很大的幫助。 | zh_TW |
dc.description.abstract | Natural killer cell ( NKC) play an important role in innate immune responses. They kill virus infected cells and tumor cells without previous sensitization that lack or have a modified major histocompatibility class I surface molecule. The function of NK cells is regulated by a balance of activating receptors and inhibitory receptors. NK cells have been well-studied in many species, including humans, mouse, rat, procine and bovine. As for canine species, there is lack of data related to NK cell specific receptors or markers. Previous study of our laboratory had discovered that CD5 positive cells in canine peripheral blood lymphocytes can be divided into two populations, CD5 low density (CD5lo) cells and CD5 high density (CD5hi) cells. The size of CD5lo cells were larger than most of T cells and CD5hi cells, and contained numerous large cytoplasmic granules after IL-2 stimulation examined by light and electron microscopy. For this reason, we further studied and prove that after IL-2 stimulation, the CD5lo cell had strong cytotoxicity for CTAC, the target cell for canine NKC, after IL-2 stimulation. In addition, by Real-time RT-PCR, we found that CD5lo PBL had higher level of mRNAs of NK cell-related receptor than CD5hi PBL including NKG2D, CD16, CD94, CD160, perforin and Granzyme B. After IL-2 stimulation, CD5lo cells had significantly higher NK cell-related receptor mRNAs than CD5hi cells including NKp30, NKp44 , CD16 and CD94. Taken together, we belive that CD5lo subset is strongly associated with canine NKC activities. This is the first report to detaily characterize CD5lo in canine speies. These findings are useful for the study of canine NKC. | en |
dc.description.provenance | Made available in DSpace on 2021-06-13T00:38:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ntu-96-R93629023-1.pdf: 1325513 bytes, checksum: 153a7c2b793889fdd9f183bf290532e3 (MD5) Previous issue date: 2007 | en |
dc.description.tableofcontents | 口試委員會審定書••••••••••••••••••••••••••i
致謝••••••••••••••••••••••••••••••••ii 中文摘要••••••••••••••••••••••••••••••iv 英文摘要••••••••••••••••••••••••••••••v 目錄••••••••••••••••••••••••••••••••vi 圖次••••••••••••••••••••••••••••••••ix 表次••••••••••••••••••••••••••••••••x 縮寫符號••••••••••••••••••••••••••••••x 第一章 緒言•••••••••••••••••••••••••••••1 第二章 文獻探討•••••••••••••••••••••••••••2 第一節 自然殺手細胞•••••••••••••••••••••2 一、 NKC之功能•••••••••••••••••••••2 二、 NKC對自體免疫耐受性••••••••••••••••6 三、 NKC於先天免疫反應(Innate immunity)之作用•••••••7 四、 NKC於後天免疫反應(Adaptive immunity)之作用•••••8 五、 NKC於其他免疫反應中之作用••••••••••••11 第二節 NKC接受器••••••••••••••••••••12 一、 NKC接受器之調控•••••••••••••••••12 二、 NKC接受器的種類••••••••••••••••••13 a. KIR••••••••••••••••••••••••13 b. Ly49••••••••••••••••••••••••14 c. CD94/NKG2 family 接受器••••••••••••••14 d. 自然毒殺型接受器••••••••••••••••••15 e. NKG2D•••••••••••••••••••••••16 f. 2B4••••••••••••••••••••••••19 g. CD16和CD56••••••••••••••••••••20 第三節 CD5接受器•••••••••••••••••••••21 一、 CD5分子••••••••••••••••••••••21 二、 CD5接受器之功能••••••••••••••••••22 三、 CD5與NKC之關聯性••••••••••••••••22 第四節 犬NKC•••••••••••••••••••••••23 一、 犬NKC之型態與特性•••••••••••••••••24 二、 犬NKC細胞表面標記與接受器相關研究•••••••••24 第 五 節 結論••••••••••••••••••••••••26 第三章 實驗目標••••••••••••••••••••••••••27 第四章 材料與方法•••••••••••••••••••••••••28 一、 實驗動物•••••••••••••••••••••••••28 二、 犬週邊血液單核球(Peripheral blood mononuclear cell, PBMC)之製備•28 三、 流式細胞儀分析細胞表面抗原••••••••••••••••28 四、 犬淋巴激素活化殺手細胞培養••••••••••••••••29 五、 犬CD5細胞特性分析••••••••••••••••••••30 1. CD5細胞分選•••••••••••••••••••••••30 2. CD5lo及CD5hi細胞型態分析•••••••••••••••••30 3. CD5lo及CD5hi細胞族群表型測試•••••••••••••••31 4. CD5細胞功能性測試••••••••••••••••••••31 a. NK細胞毒殺試驗•••••••••••••••••••31 b. Cytokine release•••••••••••••••••••33 5. CD5陽性細胞表面NK接受器及細胞激素mRNA之表現••••34 a. 細胞內RNA之萃取••••••••••••••••••34 b. 反轉錄反應( Reverse transcription ) •••••••••••34 c. 各種引子設計••••••••••••••••••••35 d. 聚合酉每連鎖反應 (Polymerase chain reaction, PCR ) ••••37 e. PCR產物之純化及訂序••••••••••••••••38 f. Real - time RT-PCR••••••••••••••••••39 六、 分選犬大型顆粒性細胞中之CD3- CD4- CD14- CD8α- CD21-細胞••39 七、 犬T細胞接受器DNA序列之分析•••••••••••••••40 第五章 結果••••••••••••••••••••••••••••41 第一節 CD5細胞特性分析••••••••••••••••••41 1. 細胞表面抗原分析•••••••••••••••••••41 2. 細胞形態學觀察••••••••••••••••••••45 第二節 CD5細胞功能性分析••••••••••••••••••47 1. NKC毒殺作用•••••••••••••••••••••47 2. IFN-γ的分泌••••••••••••••••••••••50 第三節 CD5細胞NK表面抗原、接受器及細胞激素之基因表現分析••52 1. NK表面抗原及接受器之比較•••••••••••••••52 2. 細胞激素之比較••••••••••••••••••••56 第四節 犬大型顆粒性細胞中非T非B細胞之NK毒殺能力試驗••••59 第五節 犬CD5lo細胞之T細胞接受器DNA序列分析•••••••••62 第六章 討論•••••••••••••••••••••••••••• 65 第七章 參考文獻••••••••••••••••••••••••••72 | |
dc.language.iso | zh-TW | |
dc.title | 犬週邊血液CD5lo淋巴球具有自然殺手細胞之特性 | zh_TW |
dc.title | CD5lo canine peripheral blood lymphocytes have natural killer cell activities | en |
dc.type | Thesis | |
dc.date.schoolyear | 95-2 | |
dc.description.degree | 碩士 | |
dc.contributor.coadvisor | 莊榮輝 | |
dc.contributor.oralexamcommittee | 詹東榮,林大盛,陶秘華 | |
dc.subject.keyword | 犬自然殺手細胞,週邊血液淋巴球,淋巴激素活化殺手細胞,CD5lo細胞,自然毒殺作用, | zh_TW |
dc.subject.keyword | canine natural killer cells,peripheral blood lymphocytes,lymphokine - activated killers,CD5lo cells,natural cytotoxicity, | en |
dc.relation.page | 94 | |
dc.rights.note | 有償授權 | |
dc.date.accepted | 2007-07-25 | |
dc.contributor.author-college | 生物資源暨農學院 | zh_TW |
dc.contributor.author-dept | 獸醫學研究所 | zh_TW |
顯示於系所單位: | 獸醫學系 |
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