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http://tdr.lib.ntu.edu.tw/jspui/handle/123456789/24168
標題: | 蚯蚓Metaphire posthuma 中間絲蛋白質之探討:胺基酸序列與組織表現 Characterization of intermediale filament proteins of the earthworm Metaphire posthuma |
作者: | Fan-Hao Hsu 徐凡皓 |
指導教授: | 楊西苑 |
關鍵字: | NULL |
出版年 : | 2004 |
學位: | 碩士 |
摘要: | 我們從環節動物黑蚯蚓 Metaphire posthuma 的咽部肌肉組織及腹神經索分別定序出 IF-A 及 IF-B 兩個新的中間絲蛋白質 cDNA 核酸序列。 IF-A 及IF-B 的胺基酸序列皆具有典型中間絲蛋白質的三個 domains ;包括中央的rod domain 、N 端的 head domain 及 C 端的tail domain 。 此外, IF-A 與IF-B rod domain 的 1B 部分皆具有 42 個額外的胺基酸,與所有已知的無脊椎動物中間絲蛋白質及 nuclear lamins 相同,而異於脊椎動物中間絲蛋白質。 IF-A tail domain 的部分序列亦與 lamins相似,具有lamin-tail homology ,相反地, IF-B 則不含此序列。藉由 RT-PCR 實驗 ,我們於蚯蚓的咽部肌肉組織、腹神經索、腸子前端、皮膚及儲精囊進行 IF-A 及 IF-B 的增幅反應,結果發現僅咽部肌肉組織呈現 IF-A 陽性反應,而所有五個組織呈 IF-B 陽性反應。將呈陽性反應的增幅產物分別送交定序,結果也各自符合 IF-A 及 IF-B 的核酸序列。再以 Northern blot hybridization 針對上述五組織進行 IF-A -specific 的DNA 探針雜和反應 ,結果也僅咽部肌肉組織的 total RNA 呈現 IF-A 陽性反應。因此暗示了 IF-A 是一個具有肌肉組織專一性的中間絲蛋白質。先前研究以18S rDNA 序列將後生動物中的兩側對稱動物分為後口動物及前口動物,後者又可再分為ecdysozoa 及lophotrochozoa 二群類。後口動物包括如脊椎動物,ecdysozoa 如線蟲動物,而 lophotrochozoa 則如常見的環節動物、軟體動物及扁形動物。我們蒐集脊椎動物(人類、小鼠及二種魚類)、 ecdysozoa 動物(二種線蟲動物)及 lophotrochozoa 動物(環節、軟體及扁形動物)的中間絲蛋白質 rod domains ,以相近似分析法建構親緣關係樹。結果顯示上述動物的中間絲蛋白質可分為 3 個群組(I-III ) ,每一群內含 2 個次群組( a 及 b )。其中Ia 由ecdysozoa 線蟲的部分中間絲蛋白質組成 ,Ib 群組由人類與小鼠的第一型中間絲蛋白質組成,此群組( I )應為較古老的中間絲蛋白質。 II群組則包括前口動物,其中ecdysozoa 其餘的中間絲蛋白質組成Ila ,而lophotrochozoa 的中間絲蛋白質組成IIb。III群組則包括後口動物,其中IIIa由第二型中間絲蛋白質組成,IIIb則由第三及第四型中間絲蛋白質組成。此外,扁形動物中間絲蛋白質也位於lophotrochozoa IIb 中。上述II與III群組的分類及扁形動物所屬群組皆與以18S rDNA 分類動物的結果相符合。此外, IF-A 具有肌肉組織專一性與脊椎動物肌肉組織專一性的 desmin 並非同源,二者關係為趨同演化之結果。 |
URI: | http://tdr.lib.ntu.edu.tw/jspui/handle/123456789/24168 |
全文授權: | 未授權 |
顯示於系所單位: | 分子與細胞生物學研究所 |
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