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http://tdr.lib.ntu.edu.tw/jspui/handle/123456789/22736
標題: | 調控sporamin基因在甘藷塊根中表現的轉錄因子之研究 Identification of the novel regulatory protein of sporamin gene |
作者: | Jui-Yun Liao 廖睿妘 |
指導教授: | 葉開溫 |
關鍵字: | 甘藷,GRAS基因家族,轉錄因子,塊根, Ipomoea batatas,GRAS gene,sweet potato,transcription factors,tuberous root, |
出版年 : | 2010 |
學位: | 碩士 |
摘要: | sporamin為甘藷塊根中高含量的可溶性蛋白質,其基因表現具有組織專一性,主要會在塊根中具有高含量的表現,在其他組織則相當微量。先前研究已發現sporamin基因啟動子上方約100 bp (-830~-733 bp)片段,可能參與調控sporamin在塊根中專一表現。本研究利用酵母菌單雜合法篩選方式,針對甘藷塊根cDNA庫進行選殖,選取得一個可能與sporamin啟動子序列結合之典型結構GRAS domain的蛋白質。序列比對及譜系分析顯示,此蛋白質歸屬於植物專一性轉錄調節因子家族GRAS family中之PAT1-like subfamily,因而命名為IbGRAS。胞內定位分析顯示IbGRAS會同時在細胞質與核中;凝膠遲滯試驗分析顯示IbGRAS無法直接與sporamin啟動子上100 bp片段直接結合;但以阿拉伯芥進行葉肉細胞原生質體進行轉錄活性測試發現此蛋白質則具有活化下游基因表現的能力。此一現象在GRAS基因家族中甚為常見。
南方墨漬法分析IbGRAS在甘藷中至少具有兩個以上的基因拷貝數。北方墨漬法顯示,IbGRAS基因表現並不單侷限於甘藷塊根中,其表現量以葉、根部為多,莖部最少,且隨著根部發育膨大成塊根而增加。大量表現IbGRAS之阿拉伯芥轉殖株,其比帶有空載體之對照組植物根系發展發達,植株更為壯碩。分析甘藷植株經荷爾蒙與非生物逆境處理下IbGRAS表現情形,發現此基因在根或葉部均會受到GA處理而降低表現;在根部表現也會受到乾旱處理而抑制。綜合這些現象,我們初步推論IbGRAS具有轉錄活化的能力,可能在甘藷植株的葉部與根部中扮演了不同的角色。 |
URI: | http://tdr.lib.ntu.edu.tw/jspui/handle/123456789/22736 |
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