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| DC 欄位 | 值 | 語言 |
|---|---|---|
| dc.contributor.advisor | 周子賓(Tze-Bin Chou) | |
| dc.contributor.author | Yi-Jing Lee | en |
| dc.contributor.author | 李依靜 | zh_TW |
| dc.date.accessioned | 2021-06-08T01:44:39Z | - |
| dc.date.copyright | 2020-08-21 | |
| dc.date.issued | 2020 | |
| dc.date.submitted | 2020-08-19 | |
| dc.identifier.uri | http://tdr.lib.ntu.edu.tw/jspui/handle/123456789/19088 | - |
| dc.description.abstract | 動脈粥狀硬化在國內外都具有極高的盛行率及致死率。除受到飲食影響，目前也已知基因組的高甲基化與心血管疾病成正相關。根據研究顯示母親高膽固醇血脂症會藉著 DNA 甲基化的方式影響胎兒在子宮內的發育，且讓子代成年後有較高的機會罹患代謝相關疾病或心血管疾病，但目前對於親代如何透過表觀遺傳學的方式調控子代動脈粥狀硬化的機制尚不清楚。因此本實驗以控制組飲食（control diet, CD）誘導親代母鼠，並於孕前及哺乳期以腹腔注射方式給予 DNA 甲基轉移酶抑製劑 5-aza-2’-deoxycytidine 探討是否可以減輕子代罹患動脈粥狀硬化的風險。 本實驗以 ApoE-/- 小鼠為模式，妊娠前以控制組飲食（control diet, CD）誘導親代母鼠，並隨機分配施打 PBS 或5Aza-dC，其生下的子代統一餵食 WD（western diet, WD），故本實驗子代小鼠可分成兩組：PBS+ CW組及5Aza-dC + CW組。 我們發現和 PBS+ CW 組相比，5Aza-dC + CW 組受到親代 5Aza-dC 處理的影響，減緩成年後罹患動脈粥狀硬化的風險，且在血液及脾臟中發現有較低比例的 CD8 T 細胞。此外，我們也發現親代母鼠施打 5Aza-dC 會減緩子代雄鼠 M1 巨噬細胞的極化分化，抑制促發炎反應，因而減緩動脈粥狀硬化斑塊的形成。進一步探討其機制發現與 PBS + CW 組相比，於 5Aza-dC + CW 組子代雄鼠中 5Aza-dC 處理有抗發炎作用且使調控巨噬細胞極化分化的 Hmox1 基因表現量顯著上升，其上游轉錄因子 Nfe2l2 表現量也有相同的趨勢。 總結，我們發現親代母鼠 5Aza-dC 處理，會透過抑制子代 M1 巨噬細胞的極化分化及發炎反應來減緩子代罹患動脈粥狀硬化病症的風險。 | zh_TW |
| dc.description.abstract | It is increasingly recognized that in utero environment is an important determinant of adult disease. Maternal hypercholesterolemia increases the susceptibility of atherosclerosis in offspring through epigenetic, yet the mechanisms are poorly understood. We aim to study whether inhibition of DNA methylation in Apolipoprotein E knockout (ApoE-/-) dams ameliorates atherosclerosis in adult offspring. In our study, ApoE-/- female mice were fed with a control diet (CD). Meanwhile, PBS or DNA methyltransferase inhibitor 5-aza-2'-deoxycytidine (5Aza-dC) was adminisered before pregnancy and during lactation. All offspring were fed with a western diet (WD) starting from weaning to 16 weeks of age. Two groups of offspring were generated: PBS + CW, 5Aza-dC + CW. Compare to PBS + CW group, 5Aza-dC + CW group developed markedly decreased atherosclerotic lesions and exhibited lower proportions of CD8 T cells in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) and splenocytes. In addition, maternal 5Aza-dC treatment decreased the expression of M1 macrophage markers CD86 and proinflammatory cytokine production in male offspring. To explore the molecular mechanism, we observed the upregulation of transcription factor Nfe2l2 (Nrf2) and its target gene Hmox1 (HO-1) in 5Aza-dC + CW group compare to PBS + CW group. Taken together, we demonstrated that maternal 5Aza-dC treatment ameliorated the progression of atherosclerosis likely through inhibition of inflammatory response and avtivation of Nrf2/HO-1 pathway in macrophage. | en |
| dc.description.provenance | Made available in DSpace on 2021-06-08T01:44:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 U0001-1708202018213400.pdf: 6516950 bytes, checksum: c64b535d8aa41c16d5ce56036f08d8f7 (MD5) Previous issue date: 2020 | en |
| dc.description.tableofcontents | 中文摘要 i Abstract ii 代號與縮寫對照表 iii 總目錄 vi 圖目錄 x 表目錄 xii 第一章 緒論 1 第一節 前言 1 第二節 文獻回顧 3 一、 代謝症候群與心血管疾病 3 二、 發炎反應與動脈粥狀硬化之關係 10 三、 免疫細胞與動脈粥狀硬化的關係 12 四、 DNA甲基化與動脈粥狀硬化的關係 27 五、 發展規劃與表觀遺傳學 29 第三節 研究假說 32 第二章 實驗設計與材料方法 33 第一節 前言與實驗設計 33 第二節 材料與方法 35 一、飲食誘導ApoE-/- 母鼠及抑制DNA甲基化 35 二、飼料配製 36 三、子代實驗鼠繁殖 38 四、子代飼養方式及飼養環境 38 五、禁食血清樣本收集 38 六、血清生化分析 39 七、腹腔注射胰島素耐受性測試 (Intraperitoneal Insulin tolerance test, IPITT) 39 八、動物犧牲及組織樣品收集 40 九、粥狀硬化斑塊分析 (atherosclerotic lesion analysis) 41 十、主動脈竇冷凍切片染色分析 42 十一、子代小鼠肝臟脂質分析 44 十二、子代小鼠脾臟細胞取得及免疫細胞比例測定分析 45 十三、骨髓衍生巨噬細胞 (Bone marrow-derived macrophages, BMDMs)之分化潛勢分析 49 十四、細胞激素含量檢測 56 十五、抽取 mRNA (Extraction of total RNA) 59 十六、即時聚合酶鏈鎖反應 (Quantitative Real-time PCR, qRT-PCR) 61 十七、純化基因組 DNA (Genomic DNA Purification) 63 十八、DNA 甲基化定序分析（DNA Methylation analysis） 64 十九、統計分析 70 第三章 實驗結果 73 一、親代母鼠體重與血液生化指標分析 73 二、親代母鼠細胞受損及凋亡程度分析 73 三、親代母鼠 28-31 週齡犧牲時組織絕對及相對重量分析 73 四、親代母鼠 28-31 週齡犧牲時動脈粥狀硬化斑塊分析 74 五、親代母鼠骨髓衍生巨噬細胞極化分化潛勢分析 74 六、親代母鼠骨髓衍生 M2 巨噬細胞抑制發炎相關基因 mRNA 表現量分析 75 七、子代離乳後至 16 週犧牲時之體重變化 75 八、子代離乳後至 16 週犧牲時之血液生化指標變化 76 九、子代腹腔注射葡萄糖耐受性測試（IPGTT） 76 十、子代腹腔注射胰島素耐受性測試（IPITT） 77 十一、子代小鼠 16 週齡犧牲時組織絕對及相對重量分析 78 十二、子代小鼠 16 週齡犧牲時肝臟脂肪含量分析 78 十三、子代小鼠 16 週犧牲時動脈粥狀硬化斑塊分析 79 十四、子代小鼠 16 週齡犧牲時主動脈竇斑塊面積定量分析 79 十五、子代小鼠 16 週齡犧牲時周邊血液單核細胞之免疫細胞組成分析 80 十六、子代小鼠 16 週齡犧牲時脾臟內免疫細胞組成分析 81 十七、子代小鼠脾臟免疫細胞細胞激素分泌之分析 81 十八、子代小鼠骨髓衍生巨噬細胞極化分化潛勢分析 82 十九、子代小鼠骨髓衍生 M1 巨噬細胞細胞激素分泌之分析 83 二十、子代雄鼠骨髓衍生 M1 巨噬細胞促發炎相關基因 mRNA 表現量分析 83 二十一、子代雄鼠骨髓衍生 M0 巨噬細胞調控極化分化之轉錄因子 mRNA 表現量分析 84 二十二、子代雄鼠骨髓衍生 M0 巨噬細胞調控極化分化之轉錄因子 Nef2l2 甲基化程度分析 84 第四章 討論與結論 120 第一節 討論 120 一、 5Aza-dC的施打對親代母鼠細胞毒性之影響 120 二、 親代母鼠施打 5Aza-dC 對子代小鼠生理及代謝相關指標之影響 120 三、 親代母鼠施打 5Aza-dC 減緩子代小鼠罹患動脈粥狀硬化之風險 123 四、 親代母鼠施打 5Aza-dC 對子代小鼠免疫細胞比例之影響 124 五、 餵食控制組飲食之親代母鼠施打5Aza-dC減少子代促發炎M1巨噬細胞的生成 130 第二節 結論 136 附錄 Appendix 137 第五章 參考文獻 165 | |
| dc.language.iso | zh-TW | |
| dc.subject | 動脈粥狀硬化 | zh_TW |
| dc.subject | 表關遺傳 | zh_TW |
| dc.subject | 巨噬細胞極化分化 | zh_TW |
| dc.subject | atherosclerosis | en |
| dc.subject | macrophage polarization | en |
| dc.subject | epigenetic | en |
| dc.title | ApoE 基因缺乏母鼠施打 DNA 甲基轉移酶抑制劑對子代小鼠動脈粥狀硬化進程之影響：巨噬細胞極化分化之角色 | zh_TW |
| dc.title | Effects of maternal DNA methyltransferase inhibitor treatment in Apolipoprotein E-deficient mice on the progression of atherosclerosis in their adult offspring: A crucial role for macrophage polarization | en |
| dc.type | Thesis | |
| dc.date.schoolyear | 108-2 | |
| dc.description.degree | 碩士 | |
| dc.contributor.coadvisor | 林甫容(Fu-Jung Lin) | |
| dc.contributor.oralexamcommittee | 黃青真(Ching jang Huang),呂紹俊(Shao-Chun Lu),蔡幸真(Hsing-Chen Tsai),蘇慧敏 (Hui-min Su) | |
| dc.subject.keyword | 動脈粥狀硬化,表關遺傳,巨噬細胞極化分化, | zh_TW |
| dc.subject.keyword | atherosclerosis,epigenetic,macrophage polarization, | en |
| dc.relation.page | 182 | |
| dc.identifier.doi | 10.6342/NTU202003834 | |
| dc.rights.note | 未授權 | |
| dc.date.accepted | 2020-08-20 | |
| dc.contributor.author-college | 生命科學院 | zh_TW |
| dc.contributor.author-dept | 分子與細胞生物學研究所 | zh_TW |
| 顯示於系所單位： | 分子與細胞生物學研究所 | |
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|---|---|---|---|
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