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| DC 欄位 | 值 | 語言 |
|---|---|---|
| dc.contributor.advisor | 陳明汝(Ming-Ju Chen) | |
| dc.contributor.author | Chun-yu Chien | en |
| dc.contributor.author | 簡群育 | zh_TW |
| dc.date.accessioned | 2021-06-08T01:21:47Z | - |
| dc.date.copyright | 2014-08-12 | |
| dc.date.issued | 2014 | |
| dc.date.submitted | 2014-08-06 | |
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Antioxidant activity of aqueous extract fractions of velvet antler (Cervus elaphus linnaeus). J. Food Drug Anal. 18: 319-327. Zhao, L., Y. C. Luo, C. T. Wang and B. P. Ji. 2011. Antioxidant activity of protein hydrolysates from aqueous extract of velvet antler (Cervus elaphus) as influenced by molecular weight and enzymes. Nat. Prod. Commun. 6: 1683-1688 Zhou, Q. L., Y. J. Guo, L. J. Wang, Y. Wang, Y. Q. Liu, Y. Wang and B. X. Wang. 1999. Velvet antler polypeptides promoted proliferation of chondrocytes and osteoblast precursors and fracture healing. Acta. Pharmacol. Sin. 20: 279-282. Zhou, R. and S. F. Li. 2009a. Supercritical carbon dioxide and co-solvent extractions of estradiol and progesterone from antler velvet. J. Food Compos. Anal. 22: 72-78. Zhou, R. and S. F. Li. 2009b. In vitro antioxidant analysis and characterisation of antler velvet extract. Food Chem. 114: 1321-1327. | |
| dc.identifier.uri | http://tdr.lib.ntu.edu.tw/jspui/handle/123456789/18722 | - |
| dc.description.abstract | 鹿茸為中國傳統名貴藥材及健康食品，具有增強體魄與提升免疫力之功效。本實驗室先前的研究中，於細胞試驗及小鼠試驗均證實臺灣水鹿鹿茸萃取粉之免疫調節能力，具有刺激免疫反應(促進細胞增生、細胞吞噬活性)及抑制免疫反應(抗發炎反應)的效果，因此本研究目的為鑑定臺灣水鹿鹿茸冷水萃取粉中具有免疫調節功效的有效成分。在鹿茸水萃物基本組成分中，粗蛋白質高達83.3 %，灰分10.4%。為了更了解萃取物的有效成分，藉由濃縮離心管將鹿茸冷水萃取粉依分子量分為(1) 大於10 kDa; (2) 介於5-10 kDa 之間(3) 小於 5 kDa三個部分。經由體外試驗可得知，分子量介於5-10 kDa和小於5 kDa的處理組，可有效抑制巨噬細胞株RAW 264.7產生前發炎反應細胞激素，腫瘤壞死因子-α及介白素-6，並具有促進細胞增生的能力。此外，當經100 °C加熱15分鐘後，鹿茸水萃物仍然具有抗發炎反應的能力。
接著進一步藉由十二烷基硫酸鈉聚丙烯醯胺凝膠電泳(SDS-PAGE)以及液相色譜-質譜聯用，對分子量小於10 kDa的部分進行蛋白質身分鑑定，並於 MASCOT 資料庫比對蛋白質的身分，當中比對結果相似程度最高者為牛(Bos Taurus)的profilin-1，其他比對到可能性較高的蛋白質還包括紅鹿(Cervus elaphus)的fatty acid-binding protein-4，和單峰駱駝(Camelus dromedarius)的泛素(ubiquitin)。此外，利用高效能液相層析法成功將臺灣水鹿鹿茸萃取物分離，並收集純化出不同的片段。經體外試驗證實，許多片段仍然具有抑制巨噬細胞株RAW 264.7產生前發炎反應細胞激素的能力，並經質譜鑑定，結果顯示這些片段大多為鹿茸血中的蛋白質或其胜肽片段。 綜上所述，有效成分可能為分子量小於10 kDa，並具有耐熱性的水溶性蛋白質或胜肽片段，以及鹿茸血中的蛋白質成分。未來我們還會與其他鹿種來源的鹿茸比較，以找出臺灣水鹿鹿茸萃取物中所特有的有效成分。 | zh_TW |
| dc.description.abstract | Velvet antler (VA) is one of the most valuable Chinese traditional medicines and commercial functional foods with enhancing vital energy and immune system. In our previous studies, we had demonstrated the anti-inflammatory and immunomodulatory effects of cold water extraction of VA from Formosan samber deer (Rusa unicolor swinhoii). Thus, the purpose of this study is to identify the active components in the cold water extraction. The proximate composition of VA cold water extraction powder was 83.3% of crude protein and 10.4 % of ash. To further identify the active components in the extraction, the cold water extraction powder of VA was separated into three populations by ultra-filtration concentrator based on molecular weight: (1) >10 kDa; (2) 5-10 kDa and (3) <5 kDa, and evaluated their anti-inflammatory effects in-vitro using RAW 264.7 macrophage-like cells stimulated with lipoteichoic acid (LTA). The results of pro-inflammatory cytokines showed that the production of tumor necrosis factor-α (TNF-α) and interleukin-6 (IL-6) by LTA stimulation were significantly suppressed after co-cultured with 5-10 kDa and < 5 kDa samples of VA extracts. Besides, heat treatment at 100°C for 15 minutes did not affect the anti-inflammatory effect of VA extract samples.
We further analyzed the protein profile by sodium dodecyl sulfate gel electrophoresis (SDS-PAGE) and liquid chromatography (LC)-Mass spectrophotometer (MS)/MS of the cold water extractions. Three possible proteins were identified as profilin-1 from bovine (Bos taurus), fatty acid-binding protein-4 from red deer (Cervus elaphus), and ubiquitin from dromedary (Camelus dromedarius). Additionally, we also used high-performance liquid chromatography (HPLC) to separate and purify the fractions from VA cold water extraction. We found that some fractions separated from VA cold water extraction powder still had ability to suppress the pro-inflammatory cytokines production. After further identify the fractions, we found most of them were the proteins or peptides from antler blood. According to the findings, the active components in VA water extraction from Formosa sambar deer might be heat resistance and water soluble proteins or peptides under 10 kDa, and the proteins or peptides from antler blood. We will further compare the VA from Formosan samber deer with other species, to find the unique functional components. | en |
| dc.description.provenance | Made available in DSpace on 2021-06-08T01:21:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ntu-103-R01626021-1.pdf: 3629490 bytes, checksum: 9ab5f03b74f5f134286897281046733d (MD5) Previous issue date: 2014 | en |
| dc.description.tableofcontents | 目錄
序言 i 摘要 ii 英文摘要 iv 壹、文獻探討 1 一、鹿茸簡介 1 （一）臺灣水鹿 1 （二）鹿茸主要成分 3 （三）鹿茸的機能性 9 二、鹿茸胜肽的機能性 25 （一）免疫調節 25 （二）傷口癒合及神經修復 26 （三）骨骼保健 27 （四）抗氧化 28 （五）抗疲勞 28 （六）肝臟保護 28 （七）改善心肌損傷 29 三、層析法於鹿茸萃取物分離純化之應用 30 （一）薄層色層分析法 30 （二）氣相層析法 30 （三）高效能液相層析法 31 四、鹿茸及其萃取物於蛋白質體分析之應用 34 貳、材料與方法 37 第一節：臺灣水鹿及紅鹿鹿茸水萃粉之製備 38 一、試驗材料 38 （一）臺灣水鹿鹿茸 38 （二）臺灣紅鹿鹿茸及進口紐西蘭紅鹿鹿茸 38 二、試驗方法 38 （一）鹿茸粉（VA powder）製備 38 （二）鹿茸萃取粉製備 39 第二節：鹿茸冷水萃取粉基本組成分之測定 41 一、試驗材料 41 （一）臺灣水鹿及紅鹿鹿茸萃取粉 41 二、試驗方法 41 （一）水分 41 （二）灰分 41 （三）粗蛋白質 42 （四）統計分析 43 第三節：鹿茸冷水萃取粉耐熱試驗以及依分子量大小測量其機能性 44 一、試驗材料 44 （一）臺灣水鹿鹿茸萃取粉 44 （二）試驗細胞 44 二、試驗方法 44 （一）小鼠巨噬細胞株 RAW 264.7之培養 44 （二）臺灣水鹿鹿茸冷水萃取粉加熱失活試驗 44 （三）臺灣水鹿鹿茸冷水萃取粉以離心濃縮管區分分子量大小 45 （四）臺灣水鹿鹿茸冷水萃取粉與細胞共培養 45 （五）統計分析 49 第四節：利用高效能液相層析進一步分離純化鹿茸冷水萃取粉 51 一、試驗材料 51 二、試驗方法 51 （一）鹿茸萃取物之純化 51 第五節：比較臺灣水鹿鹿茸與紅鹿鹿茸切片外觀及顯微構造 55 一、試驗材料 55 （一）臺灣水鹿及紅鹿鹿茸冷凍乾燥切片 55 二、試驗方法 55 （一）鹿茸冷凍乾燥切片外觀之比較 55 （二）利用色澤分析儀測量鹿茸冷凍乾燥切片外觀顏色差異 55 （三）鹿茸冷凍乾燥切片掃瞄式電子顯微鏡觀察 55 （四）統計分析 56 第六節：鹿茸冷水萃取粉可能有效成分之鑑定 58 一、試驗材料 58 （一）臺灣水鹿及紅鹿鹿茸萃取粉 58 二、試驗方法 58 （一）十二烷基硫酸鈉聚丙烯醯胺凝膠電泳（SDS-PAGE） 58 （二）蛋白質身分鑑定 60 參、結果與討論 61 第一節：臺灣水鹿鹿茸冷水萃取粉可能有效成分之探討 61 一、臺灣水鹿鹿茸冷水萃取粉基本組成分測定 61 二、加熱對鹿茸冷水萃取粉功效性的影響 62 三、臺灣水鹿鹿茸冷水萃取粉中不同分子量大小對免疫調節能力的影響 64 （一） 抗發炎反應能力 64 （二） 促進免疫細胞增生能力 68 四、臺灣水鹿鹿茸冷水萃取粉之蛋白質身分鑑定 72 （一） SDS-PAGE 蛋白質電泳分析 72 （二） LC-MS/MS蛋白質身分鑑定 73 第二節：利用高效能液相層析分離純化臺灣水鹿鹿茸冷水萃取粉中可能有效成分之探討 82 一、 以HPLC分離純化臺灣水鹿鹿茸水萃粉 82 二、 LC-MS/MS蛋白質身分鑑定 89 第三節：臺灣水鹿鹿茸及其萃取物與紅鹿鹿茸及其萃取物之比較 106 一、 鹿茸冷凍乾燥切片外觀之比較 106 （一）肉眼觀察 106 （二）以色澤分析儀測量之比較 106 二、 鹿茸切片顯微構造之比較 110 三、 鹿茸冷水萃取粉成分比較 118 肆、結論 121 參考文獻 122 作者小傳 137 | |
| dc.language.iso | zh-TW | |
| dc.title | 鑑定臺灣水鹿鹿茸冷水萃取物中免疫調節有效成分之研究 | zh_TW |
| dc.title | Identification of immunomodulatory components from cold water extraction of velvet antler of Formosan sambar deer | en |
| dc.type | Thesis | |
| dc.date.schoolyear | 102-2 | |
| dc.description.degree | 碩士 | |
| dc.contributor.oralexamcommittee | 林慶文(Chin-Wen Lin),呂廷璋(Ting-Jang Lu),郭卿雲(Ching-Yun Kuo),劉?睿(Je-Ruei Liu) | |
| dc.subject.keyword | 臺灣水鹿,鹿茸,冷水萃取,免疫調節, | zh_TW |
| dc.subject.keyword | Formosan sambar deer,velvet antler,cold water extraction,immunomodulatory, | en |
| dc.relation.page | 137 | |
| dc.rights.note | 未授權 | |
| dc.date.accepted | 2014-08-07 | |
| dc.contributor.author-college | 生物資源暨農學院 | zh_TW |
| dc.contributor.author-dept | 動物科學技術學研究所 | zh_TW |
| 顯示於系所單位： | 動物科學技術學系 | |
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|---|---|---|---|
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